6.答:(1)阳离子可以中和DNA中带负电荷的磷酸集团,减弱DNA链间 静电作用,促进两条互补的多核苷酸链的相互靠近,从而促进DNA复性 (2)温度升高可使DNA变性,因此温度降低到熔点以下可以促进 DNA的复性。 (3)DNA链的浓度增加可以加快互补随机碰撞的速度,从而促进 DNA的复性。 7.答:核酸内切酶作用于超螺旋的环状病毒DNA分子,在其中的一条链上 产生“缺刻”,释放张力,则超螺旋转变为松弛态。线形DNA分子只有当两 端都被固定时,才能产生超螺旋。 8.答:(1)mRNA序列为 5 UCGUCGACGAUGAUCAUCGGCUACUCGA3 (2)多肽序列为 lle-lle-Gly- Tyr-Ser (3)多肽序列为 lle-lle-Gly-Thr-Arg 多肽序列为 lle-lle-Gly 9.答:绝大多数核酸酶在发挥作用时需要Mg2的参与。当加入金属熬合剂 EDTA后,Mg2+将被熬合,从而抑制了核酸酶的活性。 10.在高离子强度的溶液中,核酸酶会失去与DNA结合的能力,所以它就 不能作用于核苷酸 11.答:大肠杆菌产生核酸限制性内切酶是为了水解破坏外源的DNA,而 大肠杆菌本身的DNA已经被甲基化修饰,所以不被其本身的核酸限制 性内切酶水解 PH2.5 PH3.5 PH6 PH8PH11.4 UMP负电荷最 1.5 负电荷最 GMP -0.95 -2 多 AMP负电荷较 「cMP带正电荷-016-15 322 电泳分离四种核苷酸应取PH3.5,在该PH时,这四种单核苷酸所 带负电荷差异较大,它们向正极移动,但移动速度不同,依次为:UMP, GMP,AMP,CMP(从大到小)应取PH80,这样可使各核苷酸带较 多负电荷,利于吸附阴离子交换树脂。虽然PHl4时核苷酸有更多的 负电菏,但PH过高对树脂不利。洗脱液的PH应取PH25当不考虑树 脂非极性吸附时洗顺序为CMP> AMP>G MP>UMP9根据PH2.5时核苷 酸负电荷的多少来决定洗脱速度)但实际上核苷酸聚苯乙烯阴离子交 换树脂之间存在着非极性吸附嘌呤碱基的非极性吸附时嘧啶基的3倍6．答：（1）阳离子可以中和 DNA 中带负电荷的磷酸集团,减弱 DNA 链间 静电作用,促进两条互补的多核苷酸链的相互靠近,从而促进 DNA 复性。 （2）温度升高可使 DNA 变性,因此温度降低到熔点以下可以促进 DNA 的复性。 （3）DNA 链的浓度增加可以加快互补随机碰撞的速度,从而促进 DNA 的复性。 7．答：核酸内切酶作用于超螺旋的环状病毒 DNA 分子,在其中的一条链上 产生“缺刻”,释放张力,则超螺旋转变为松弛态。线形 DNA 分子只有当两 端都被固定时,才能产生超螺旋。 8．答：（1）mRNA 序列为 5 ‘UCGUCGACGAUGAUCAUCGGCUACUCGA3 ‘ （2）多肽序列为 Ile-Ile-Gly-Tyr-Ser （3）多肽序列为 Ile-Ile-Gly-Thr-Arg 多肽序列为 Ile-Ile-Gly 9．答：绝大多数核酸酶在发挥作用时需要 Mg 2+的参与。当加入金属熬合剂 EDTA 后，Mg 2+将被熬合，从而抑制了核酸酶的活性。 10．在高离子强度的溶液中，核酸酶会失去与 DNA 结合的能力，所以它就 不能作用于核苷酸。 11．答：大肠杆菌产生核酸限制性内切酶是为了水解破坏外源的 DNA，而 大肠杆菌本身的 DNA 已经被甲基化修饰，所以不被其本身的核酸限制 性内切酶水解。 12．答： PH2.5 PH3.5 PH6 PH8 PH11.4 UMP 负电荷最 多 -1 -1.5 -2 -3 GMP 负电荷最 多 -0.95 -1.5 -2 -3 AMP 负电荷较 少 -0.46 -1.5 -2 -2 CMP 带正电荷 -0.16 -1.5 -2 -2 电泳分离四种核苷酸应取 PH3.5，在该 PH 时，这四种单核苷酸所 带负电荷差异较大，它们向正极移动，但移动速度不同，依次为：UMP， GMP，AMP，CMP（从大到小）应取 PH8.0，这样可使各核苷酸带较 多负电荷，利于吸附阴离子交换树脂。虽然 PH11.4 时核苷酸有更多的 负电菏，但 PH 过高对树脂不利。洗脱液的 PH 应取 PH2.5.当不考虑树 脂非极性吸附时洗顺序为 CMP>AMP>GMP>UMP9 根据 PH2.5 时核苷 酸负电荷的多少来决定洗脱速度),但实际上核苷酸聚苯乙烯阴离子交 换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附时嘧啶基的 3 倍