正在加载图片...
(二)DNA的提取与制备 1.工业用DNA的提取 取新鲜冷冻鱼精20kg,用绞肉机粉碎2次成浆,加入等体 积水,搅拌均匀,倾入反应锅内,缓慢搅拌,升温至 100℃,保温15分钟,迅速冷却至20~25℃,离心去 除鱼精蛋白等沉淀物,共获得35L含热变性DNA溶液。 加乙醇沉淀,可得到固体DNA产品。 2.具有生物活性DNA的制备 动物内脏加4倍量生理盐水经组织捣碎机捣碎1分钟, 浆于2500rpm离心30分钟,沉淀用同样体积的生理盐水 洗涤3次,每次洗涤后离心,将沉淀悬浮于20倍量的冷 生理盐水中,再捣碎3分钟,加入2倍量5%十二烷基磺 酸钠,并搅拌2~3小时,在0℃2500rpm离心,在上层 液中加入等体积的冷乙醇,离心即可得纤维状DNA 再用冷乙醇和丙酮洗涤,减压低温干燥得粗品DNA。(二) DNA的提取与制备 1.工业用DNA的提取 取新鲜冷冻鱼精20kg,用绞肉机粉碎2次成浆,加入等体 积水,搅拌均匀,倾入反应锅内,缓慢搅拌,升温至 100 ℃,保温15分钟,迅速冷却至20~25 ℃,离心去 除鱼精蛋白等沉淀物,共获得35L含热变性DNA溶液。 加乙醇沉淀,可得到固体DNA产品。 2.具有生物活性DNA的制备 动物内脏加4倍量生理盐水经组织捣碎机捣碎1分钟,匀 浆于2500rpm离心30分钟,沉淀用同样体积的生理盐水 洗涤3次,每次洗涤后离心,将沉淀悬浮于20倍量的冷 生理盐水中,再捣碎3分钟,加入2倍量5%十二烷基磺 酸钠,并搅拌2~3小时,在0 ℃2500rpm离心,在上层 液中加入等体积的冷乙醇,离心即可得纤维状DNA, 再用冷乙醇和丙酮洗涤,减压低温干燥得粗品DNA
<<向上翻页向下翻页>>
©2008-现在 cucdc.com 高等教育资讯网 版权所有