RNA干扰技术 13307130058解子傲 【简介】 RNA干扰( RNA interference)是指一种分子生物学上由 双链RNA诱发的基因沉默现象,其机制是通过阻碍特定基 因的转译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性 mRNA编码区同源的双链RNA时,该mRNA发生降解而导致基 因表达沉默。与其它基因沉默现象不同的是,在植物和线 虫中,RNAi具有传递性,可在细胞之间传播,此现象被称 作系统性RNA干扰。206年,安德鲁·法厄( Andrew Z.Fire 与克雷格·梅洛( Craig c. Mello)因为发现了RNA干扰- 双链RNA引发的沉默现象而共同获得诺贝尔生理及医学奖。在转基因的矮夲牛花中所观察到的RA干扰现象 【技术原理】 (1)sirnA RNA干扰作用是通过一类较稳定的中间介质实现的。对 植物的研究证明,双链RNA复合体先降解成为35nt左右的 小RNA分子,然后他们通过序列互补与mRNA结合,从而导 ANA clare 致mRNA降解。对果蝇的研究证明,长度为21~23nt的小RNA L srNA 分子是引起RNA干扰现象的直接原因。这种小RNA分子被称 之为小干扰RNA 在RMA干扰中一个非常重要的酶是 RNaseIii核酶家族的 画 Dicer。它可与双链RNA结合,并将其剪切成21~23nt及3 端突出的小分子RNA片段,即 SiRNA。随后 SiRNA与若干个 蛋白组成的,RNA引起的称之为RNA诱导沉默复合体 (RNA- induced silencing complex,简称RISC)结合,解旋 成单链,并由该复合体主导RNAi效应。RISC被活化后,活化型RISC受已成单链的 SiRNA引RNA 干扰技术 13307130058 解子傲 【简介】 RNA 干扰(RNA interference)是指一种分子生物学上由 双链 RNA 诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基 因的转译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性 mRNA 编码区同源的双链 RNA 时，该 mRNA 发生降解而导致基 因表达沉默。与其它基因沉默现象不同的是，在植物和线 虫中，RNAi 具有传递性，可在细胞之间传播，此现象被称 作系统性 RNA 干扰。2006 年，安德鲁·法厄(Andrew Z. Fire) 与克雷格·梅洛(Craig C. Mello)因为发现了 RNA干扰—— 双链RNA 引发的沉默现象而共同获得诺贝尔生理及医学奖。 【技术原理】 (1)siRNA RNA 干扰作用是通过一类较稳定的中间介质实现的。对 植物的研究证明，双链 RNA 复合体先降解成为 35nt 左右的 小 RNA 分子，然后他们通过序列互补与 mRNA 结合，从而导 致 mRNA 降解。对果蝇的研究证明，长度为 21～23nt 的小 RNA 分子是引起 RNA 干扰现象的直接原因。这种小 RNA 分子被称 之为小干扰 RNA。 在RNA干扰中一个非常重要的酶是RNaseIII核酶家族的 Dicer。它可与双链 RNA 结合，并将其剪切成 21～23nt 及 3' 端突出的小分子 RNA 片段，即 siRNA。随后 siRNA 与若干个 蛋白组成的，RNA 引起的称之为 RNA 诱导沉默复合体 (RNA-induced silencing complex，简称 RISC)结合，解旋 成单链，并由该复合体主导 RNAi 效应。RISC 被活化后，活化型 RISC 受已成单链的 siRNA 引 在转基因的矮牵牛花中所观察到的 RNA 干扰现象