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为酶法分析。这两类分析在原理和方法上基本相同 1.3.2.1酶活力测定 除了科研上测定酶活力外,在临床上还通过测定一些酶的活力来作为疾病诊断的根 据。例如血清淀粉酶常作为急性胰腺炎的诊断指标。谷草转氨酶是肝功能化验的一个指标。 3.22酶法分析 以酶作为工具,分析酶的底物的浓度或含量。可酶电极(葡萄糖酶电极)和酶检测试 纸(尿糖试纸)更为方便快捷地测定 1.3.2.3酶免疫分析 用酶标记抗原或抗体,通过抗原抗体的特异性结合来分析其中的一方。酶免疫分析具 有不需要特殊复杂的仪器设备、灵敏度高、重复性好、对健康无害等优点 13.3酶生物学知识的应用 酶作为生物体内的主要催化剂,与生命活动密切相关。一方面,酶在体内的活性水平 反映了生物的生理状况:另一方面,如果控制机体内酶的活性水平,就能对生物的机能活 动作出相应的调节。因此,了解酶的生物学规律和知识,对于生产实践有着极为重要的意 1.3.3.1提高发酵代谢产物的产量 ①添加酶的抑制剂:以柠檬酸生产为例,在柠檬酸发酵生产中往往会伴随形成一定量 的异柠檬酸,这是因为菌体内同时存在有顺乌头酸酶的缘故,这种酶能使部分柠檬酸转 化成异柠檬酸。为此,如果在发酵系统中添加氟乙酸等抑制剂,或在培养基中限制Fe 的供应,使顺乌头酸酶的活性受到抑制,就可以减少异柠檬酸的生成,提高柠檬酸的产 量。基于同样的道理,通过诱变获得了对氟乙酸敏感的突变株,结果柠檬酸的产量也同 样得到了显著的提高。 ②控制代谢系统中的关键酶:以用黄色棒状短杄菌生产赖氨酸为例,在这种细菌的赖 氨酸合成调节机构中,赖氨酸和苏氨酸对该代谢途径中的第一个酶,即天冬氨酸激酶表 现协同性反馈抑制效应,但赖氨酸对分枝途径的第一个酶,二氢吡啶羧酸合成酶无反馈 抑制。根据这一特点,只要控制苏氨酸的浓度,克服协同性反馈抑制,赖氨酸就可以大 量合成。基于这一认识,诱变获得了高丝氨酸脱氢酶缺失的突变体(不能合成苏氨酸),4 为酶法分析。这两类分析在原理和方法上基本相同。 1.3.2.1 酶活力测定 除了科研上测定酶活力外,在临床上还通过测定一些酶的活力来作为疾病诊断的根 据。例如血清淀粉酶常作为急性胰腺炎的诊断指标。谷草转氨酶是肝功能化验的一个指标。 1.3.2.2 酶法分析 以酶作为工具,分析酶的底物的浓度或含量。可酶电极(葡萄糖酶电极)和酶检测试 纸(尿糖试纸)更为方便快捷地测定。 1.3.2.3 酶免疫分析 用酶标记抗原或抗体,通过抗原抗体的特异性结合来分析其中的一方。酶免疫分析具 有不需要特殊复杂的仪器设备、灵敏度高、重复性好、对健康无害等优点。 1.3.3 酶生物学知识的应用 酶作为生物体内的主要催化剂,与生命活动密切相关。一方面,酶在体内的活性水平 反映了生物的生理状况;另一方面,如果控制机体内酶的活性水平,就能对生物的机能活 动作出相应的调节。因此,了解酶的生物学规律和知识,对于生产实践有着极为重要的意 义。 1.3.3.1 提高发酵代谢产物的产量 ① 添加酶的抑制剂:以柠檬酸生产为例,在柠檬酸发酵生产中往往会伴随形成一定量 的异柠檬酸,这是因为菌体内同时存在有顺乌头酸酶的缘故,这种酶能使部分柠檬酸转 化成异柠檬酸。为此,如果在发酵系统中添加氟乙酸等抑制剂,或在培养基中限制 Fe 的供应,使顺乌头酸酶的活性受到抑制,就可以减少异柠檬酸的生成,提高柠檬酸的产 量。基于同样的道理,通过诱变获得了对氟乙酸敏感的突变株,结果柠檬酸的产量也同 样得到了显著的提高。 ② 控制代谢系统中的关键酶:以用黄色棒状短杆菌生产赖氨酸为例,在这种细菌的赖 氨酸合成调节机构中,赖氨酸和苏氨酸对该代谢途径中的第一个酶,即天冬氨酸激酶表 现协同性反馈抑制效应,但赖氨酸对分枝途径的第一个酶,二氢吡啶羧酸合成酶无反馈 抑制。根据这一特点,只要控制苏氨酸的浓度,克服协同性反馈抑制,赖氨酸就可以大 量合成。基于这一认识,诱变获得了高丝氨酸脱氢酶缺失的突变体(不能合成苏氨酸)
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