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(2)转化:0℃,在1.5m1离心管中按下表加入 CaC2、受体菌及DNA进行转化实验 转化项目 CaCl2受体菌 DNA 液体LB 皿 a阳性对照 10ul PBR322DNAlng 100ul b阴性对照① 2ul连接液 100ul c阴性对照② 1 Oul 100ul d连接液转化组 60ul 6ul连接液 600ul 冰浴303—42℃2(热休克)一冰浴,2 加37℃预热LB培养45表中a、b、c各取100ul/皿 涂布(连接液转化组d梯度涂布Ⅰ50ul×2皿 Ⅱ500u浓缩后×2皿) 37℃倒置培养过夜 检查细菌生长情况转化项目 CaCl2 受体菌 DNA 液体LB 皿 a阳性对照 —— 10ul PBR322DNAlng 100ul b阴性对照① 10ul —— 2ul连接液 100ul c阴性对照② —— 10ul —— 100ul d连接液转化组 —— 60ul 6ul连接液 600ul (2)转化: 0℃,在1.5ml离心管中按下表加入 CaCl2、受体菌及DNA进行转化实验 冰浴30’ 42℃ 2’(热休克) 冰浴,2’ 加37℃预热LB培养45’ 表中a、b、c各取100ul/皿 涂布(连接液转化组d梯度涂布 I 50ul2皿; II.500ul浓缩后2皿) 37℃倒置培养过夜 检查细菌生长情况
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