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遗传转化与 GUS 基因检测的试剂配制 LB 培养基的配制: 将下列组分溶解在 0.9L 水中: 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用 1N NaOH(10~15ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L 10ml 的 10mmol/l 的 AS(乙酰丁香酮)母液(100x)配制:称 19.6mg 的 AS, 先溶于少量甲醇中,然后慢慢加蒸馏水定容至 10ml,过滤除菌,分装成 200ul/ 管(每组 1 管),使用时将 200ul 的 AS 母液加入 20ml 的 MS 液体培养基中。 50mmol/l 的磷酸钠缓冲液(pH 7.0):A 液:取 NaH2PO4.2H2O 3.12g 溶于蒸馏水, 定溶至 100ml。 B 液:取 Na2HPO4.12H2O 7.17g 溶于蒸馏水,定溶 100ml。取 A 液 39ml 与 B 液 61ml 混合,定容至 400ml,调 PH 至 7.0。 50mmol/L 铁氰化钾母液:称 3.295g,用蒸馏水定容至 200ml 50mmol/l 亚铁氰化钾母液:称 4.224g ,用蒸馏水定容至 200ml。 0.5mol/l EDTA 母液(pH8.0): 药品 分子量 100ml 500ml EDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g 双蒸 H2O 80ml 400ml 用 NaOH 调 PH 至 8.0 6g 10g DdH2O 定容至 100ml 500ml GUS 检测液的配制:100mgGluc,先溶于 1ml 的 DMF。取 80ml 50mmol/l 的磷 酸钠缓冲液(pH 7.0),加入 1ml 50mmol/L 铁氰化钾、1ml 50mmol/L 亚铁氰化钾 和 2ml 0.5mol/l EDTA(PH 8.0),再加入已溶解的 Gluc,再加 20ml 的甲醇,混 匀。(配制方法参考《现代植物生理学实验指南》p348) 将配好的 GUS 检测液分装于 1.5ml 的小管中(1ml/管,1 组 1 管),-20°C 保 存备用。遗传转化与 GUS 基因检测的试剂配制 LB 培养基的配制: 将下列组分溶解在 0.9L 水中: 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用 1N NaOH(10~15ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L 10ml 的 10mmol/l 的 AS(乙酰丁香酮)母液(100x)配制:称 19.6mg 的 AS, 先溶于少量甲醇中,然后慢慢加蒸馏水定容至 10ml,过滤除菌,分装成 200ul/ 管(每组 1 管),使用时将 200ul 的 AS 母液加入 20ml 的 MS 液体培养基中。 50mmol/l 的磷酸钠缓冲液(pH 7.0):A 液:取 NaH2PO4.2H2O 3.12g 溶于蒸馏水, 定溶至 100ml。 B 液:取 Na2HPO4.12H2O 7.17g 溶于蒸馏水,定溶 100ml。取 A 液 39ml 与 B 液 61ml 混合,定容至 400ml,调 PH 至 7.0。 50mmol/L 铁氰化钾母液:称 3.295g,用蒸馏水定容至 200ml 50mmol/l 亚铁氰化钾母液:称 4.224g ,用蒸馏水定容至 200ml。 0.5mol/l EDTA 母液(pH8.0): 药品 分子量 100ml 500ml EDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g 双蒸 H2O 80ml 400ml 用 NaOH 调 PH 至 8.0 6g 10g DdH2O 定容至 100ml 500ml GUS 检测液的配制:100mgGluc,先溶于 1ml 的 DMF。取 80ml 50mmol/l 的磷 酸钠缓冲液(pH 7.0),加入 1ml 50mmol/L 铁氰化钾、1ml 50mmol/L 亚铁氰化钾 和 2ml 0.5mol/l EDTA(PH 8.0),再加入已溶解的 Gluc,再加 20ml 的甲醇,混 匀。(配制方法参考《现代植物生理学实验指南》p348) 将配好的 GUS 检测液分装于 1.5ml 的小管中(1ml/管,1 组 1 管),-20°C 保 存备用
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