蛋白质浓度=(A28×10)A11cm28om(mg/ml (∵:1%浓度≈l0mgm 例:牛血清清蛋白:A1am=6.3(280nm) 溶菌酶 A11cm=228(280nm) 若查不到待测蛋白质的A“1cm值,则可选用一种与待测蛋白质的酪氨酸和色氨酸含 量相近的蛋白质作为标准蛋白质,用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度 为10mg/ml。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白(BSA)。 标准曲线的测定:取6支试管,按下表编号并加入试剂: 管号 5 6 BSA (1.0mg/ml) 0 102.03.04.05.0 H,O 5.04.0 3.02.0 1.00 80 用第1管为空白对照,各管溶液混匀后在紫外分光光度计上测定吸光度A280,以 A280为纵座标,各管的蛋白质浓度或蛋白质量(mg)为横座标作图,标准曲线应为直线, 利用此标准曲线,根据测出的未知样品的A280值,即可查出未知样品的蛋白质含量,也 可以用2至6管A280值与相应的试管中的蛋白质浓度计算出该蛋白质的A1cm280m 2.280nm和260nm的吸收差法 核酸对紫外光有很强的吸收,在280mm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸 在260mm处的吸收更强,其吸收高峰在260nm附近。核酸260nm处的消光系数是280nm 处的2倍,而蛋白质则相反,280nm紫外吸收值大于260nm的吸收值。通常: 纯蛋白质的光吸收比值:A280/A260≈1.8 纯核酸的光吸收比值:A28/A260≈0.5 含有核酸的蛋白质溶液,可分别测定其A280和A26,由此吸收差值,用下面的经验179 蛋白质浓度 = (A28010 )/ A1％ 1cm,280nm (mg/ml) ( 1%浓度10mg/ml) 例：牛血清清蛋白 ： A1％ 1cm=6.3 (280nm) 溶菌酶 ： A1％ 1cm=22.8 (280nm) 若查不到待测蛋白质的 A1％ 1cm值，则可选用一种与待测蛋白质的酪氨酸和色氨酸含 量相近的蛋白质作为标准蛋白质，用标准曲线法进行测定。标准蛋白质溶液配制的浓度 为 1.0mg/ml。常用的标准蛋白质为牛血清清蛋白（BSA）。 标准曲线的测定：取 6 支试管，按下表编号并加入试剂： 管号 1 2 3 4 5 6 BSA（1.0mg/ml） 0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 H2O 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0 A280 用第 1 管为空白对照，各管溶液混匀后在紫外分光光度计上测定吸光度 A280，以 A280 为纵座标，各管的蛋白质浓度或蛋白质量（mg）为横座标作图，标准曲线应为直线， 利用此标准曲线，根据测出的未知样品的 A280 值，即可查出未知样品的蛋白质含量，也 可以用 2 至 6 管 A280 值与相应的试管中的蛋白质浓度计算出该蛋白质的 A1％ 1cm,280nm 2. 280nm 和 260nm 的吸收差法 核酸对紫外光有很强的吸收，在 280nm 处的吸收比蛋白质强 10 倍（每克），但核酸 在 260nm 处的吸收更强，其吸收高峰在 260nm 附近。核酸 260nm 处的消光系数是 280nm 处的 2 倍，而蛋白质则相反，280nm 紫外吸收值大于 260nm 的吸收值。通常： 纯蛋白质的光吸收比值：A280/A260  1.8 纯核酸的光吸收比值： A280/A260  0.5 含有核酸的蛋白质溶液，可分别测定其 A280和 A260，由此吸收差值，用下面的经验