实验教案 课程名称医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验3.2抗酸染色 实验分组情况6组 学时数1.5学时 实验目的 熟悉分支杆菌抗酸染色的原理及其临床意义 2、掌探抗酸染色的基本操作方法 结核分支杆菌的细胞壁中类脂成分含量较高、对水溶性染料普通染色时不 实验原理 易若染的特点，在热力作用下石炭酸复红穿透脂质而对其细胞壁若染 设备与材料 光学显微镜、抗酸染色试剂、染色容器及医用卡介苗冻干粉 操作重点 抗酸染色的原理及其在细菌鉴定中的意义 操作难点 抗酸染色的操作方法 操作注意事项 加热若染操作的加液和时间掌握 教学法 启发、诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、复习、总结上一实验的内容和注意事项 5min 一、抗酸热鱼的原理及其临床章义 20min 1、原理：利用结核分支杆菌的细胞壁中类脂成分含量较高、对水溶性染料普通 染色时不易着染的特点，在热力作用下石炭酸复红穿透脂质而对其细 胞壁着染，再以水性美兰室温复染：从而将待检样品中的结核分支杆 菌染成红色，其它杂菌和背景染成蓝色。 2、临床意义：(1)判定感染标本中的病原菌 (2)判定标本中病原菌细胞壁的可能组成 三、染色过程 40min 1、用蒸馏水溶解卡介苗冻干粉，并涂片、固定 2、以玻片夹持夹水平夹持涂片，滴加石炭酸复红覆盖样品膜，移至酒精灯正上 方适宜距离持续加热，同时开始计时：待染液将要蒸发干前将涂片挪离热源 并停止计时：待涂片冷却后补加染液重新加热、计时直至累计加热5mi 3、到时将涂片放冷，水洗后用3%盐酸酒精脱色1min,水洗 4、以碱性美兰复染lmin,水洗后干燥镜检。 四、实验报告 5min 叙述抗酸染色过程及注意事项，并对其结果进行判定和分析。 实 验 教 案 课程名称 医学微生物学 授课专业及层次 实验项目 实验 3.2 抗酸染色 实验分组情况 6 组 学时数 1.5 学时 实验目的 1、熟悉分支杆菌抗酸染色的原理及其临床意义 2、掌握抗酸染色的基本操作方法 实验原理 结核分支杆菌的细胞壁中类脂成分含量较高、对水溶性染料普通染色时不 易着染的特点，在热力作用下石炭酸复红穿透脂质而对其细胞壁着染 设备与材料 光学显微镜、抗酸染色试剂、染色容器及医用卡介苗冻干粉 操作重点 抗酸染色的原理及其在细菌鉴定中的意义 操作难点 抗酸染色的操作方法 操作注意事项 加热着染操作的加液和时间掌握 教学法 启发、诱导式 实验内容、步骤、要求及时间分配 一、复习、总结上一实验的内容和注意事项 二、抗酸染色的原理及其临床意义 1、原理：利用结核分支杆菌的细胞壁中类脂成分含量较高、对水溶性染料普通 染色时不易着染的特点，在热力作用下石炭酸复红穿透脂质而对其细 胞壁着染，再以水性美兰室温复染；从而将待检样品中的结核分支杆 菌染成红色，其它杂菌和背景染成蓝色。 2、临床意义：（1）判定感染标本中的病原菌 （2）判定标本中病原菌细胞壁的可能组成 三、染色过程 1、用蒸馏水溶解卡介苗冻干粉，并涂片、固定 2、以玻片夹持夹水平夹持涂片，滴加石炭酸复红覆盖样品膜，移至酒精灯正上 方适宜距离持续加热，同时开始计时；待染液将要蒸发干前将涂片挪离热源、 并停止计时；待涂片冷却后补加染液重新加热、计时直至累计加热 5min 3、到时将涂片放冷，水洗后用 3%盐酸酒精脱色 1min，水洗 4、以碱性美兰复染 1min，水洗后干燥镜检。 四、实验报告 叙述抗酸染色过程及注意事项，并对其结果进行判定和分析。 5min 20min 40min 5min