GB4789.4-2010 无菌操作将样品转至500mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36C±！℃培养8h~ 18h。 如为冷冻产品，应在45℃以下不超过15min,或2℃一5℃不超过18h解冻。 5.2增菌 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL,转种于10 mLTTB内，于42℃±1℃培养18h一24 h。同时，另取1mL,转种于10mLSC内，于36℃±1℃培养18h~24h. 5.3分离 分别用接种环取增南液1环，划线接种于一个BS琼脂平板和一个XLD琼脂平板（或HE琼脂 平板或沙门氏菌属显色培养基平板)。于36℃±1℃分别培养18h~24h(X1D琼 、HE琼脂 平板、沙门氏茵属显色培养基平板)或40h~48h(BS琼脂平板)，观察各个平板上生长的菌落。 各个平板上的菌落特征见表1。 表1沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 选择性琼脂平板 少门氏菌 BS琼脂 南落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色：有些 菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。 HE琼脂 蓝绿色或蓝色，多数南落中心黑色或几乎全黑色：有些黄株为黄色，中心黑色或 机平全里佰 XLD琼脂 菌落星粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可孕现大的带光泽的黑色中心，或 呈现全部黑色的菌落：有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心， 沙门氏菌属显色培养基按照显色培养基的说明进行判定。 5.4生化试验 5.4.1自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线 再于底层穿刺：接种针不要灭菌，直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板，于36℃±1℃ 培养18h~24h,必要时可延长至48h。在三糖铁球脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内，沙门氏菌属 的反应结果见表2 表2沙门氏菌属在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果 三糖铁琼脂 赖氨酸脱羧南试验培养基 初步判断 斜面底层 产气 硫化氢 可疑沙门氏菌属 A 十（一 +(一 可疑沙门氏南屈 A A +(一) +(一) + 可疑沙门氏南属 +/- 非沙门氏 +1 非沙门氏菌 注：K:产碱，A:产酸：十：阳性，一：阴性：十（一）：多数阳性，少数阴性：十/一：阳性或阴性。 5.4.2接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时，可直接接种蛋白胨水（供做靛基质试 验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基，也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑 取可疑菌落接种。于36℃±1℃培养18h~24h,必要时可延长至48h,按表3判定结果。将已挑菌 落的平板储存于2℃~5℃或室温至少保留24h,以备必要时复查。 GB 4789.4—2010 4 无菌操作将样品转至 500 mL 锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于 36 ℃±1 ℃培养 8 h～ 18h。 如为冷冻产品,应在 45 ℃以下不超过 15 min,或 2 ℃～5 ℃不超过 18 h 解冻。 5.2 增菌 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取 1 mL，转种于 10 mL TTB 内，于 42 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。同时，另取 1 mL，转种于 10 mL SC 内，于 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h。 5.3 分离 分别用接种环取增菌液 1 环，划线接种于一个 BS 琼脂平板和一个 XLD 琼脂平板（或 HE 琼脂 平板或沙门氏菌属显色培养基平板）。于 36 ℃±1 ℃分别培养 18 h～24 h （XLD 琼脂平板、HE 琼脂 平板、沙门氏菌属显色培养基平板） 或 40 h～48 h （BS 琼脂平板），观察各个平板上生长的菌落, 各个平板上的菌落特征见表 1。 表 1 沙门氏菌属在不同选择性琼脂平板上的菌落特征 选择性琼脂平板 沙门氏菌 BS 琼脂 菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色；有些 菌株形成灰绿色的菌落，周围培养基不变。 HE 琼脂 蓝绿色或蓝色，多数菌落中心黑色或几乎全黑色；有些菌株为黄色，中心黑色或 几乎全黑色。 XLD 琼脂 菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或 呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心。 沙门氏菌属显色培养基 按照显色培养基的说明进行判定。 5.4 生化试验 5.4.1 自选择性琼脂平板上分别挑取 2 个以上典型或可疑菌落，接种三糖铁琼脂，先在斜面划线， 再于底层穿刺；接种针不要灭菌,直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板，于 36 ℃±1 ℃ 培养 18 h～24 h，必要时可延长至 48 h。在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内，沙门氏菌属 的反应结果见表 2。 表 2 沙门氏菌属在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基内的反应结果 三糖铁琼脂 初步判断 斜面 底层 产气 硫化氢 赖氨酸脱羧酶试验培养基 K A ＋（－） ＋（－） ＋ 可疑沙门氏菌属 K A ＋（－） ＋（－） － 可疑沙门氏菌属 A A ＋（－） ＋（－） ＋ 可疑沙门氏菌属 A A ＋/－ ＋/－ － 非沙门氏菌 K K ＋/－ ＋/－ ＋/－ 非沙门氏菌 注：K：产碱，A：产酸；＋：阳性，－：阴性；＋（－）：多数阳性，少数阴性；＋/－：阳性或阴性。 5.4.2 接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时,可直接接种蛋白胨水 （供做靛基质试 验）、尿素琼脂 （pH7.2）、氰化钾 （KCN） 培养基，也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑 取可疑菌落接种。于 36 ℃±1 ℃培养 18 h～24 h，必要时可延长至 48 h，按表 3 判定结果。将已挑菌 落的平板储存于 2 ℃～5 ℃或室温至少保留 24 h，以备必要时复查