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第3期 李春艳等:植物原生质体培养与融合的研宄进展 获得再生植株的植物种类不断增加,包括林木、观赏植物、药用植物、果树和作物等.目前通过原生质体培养 获得再生的植株有280余种,其中20余种是我国首先培养成功的虽然对植物原生质体的研究取得了很 大的进展,但是利用原生质体技术改良高等植物的遗传性状并将之运用于生产实践中还有很大距离今后 的任务为:1)进一步扩大原生质体培养材料的种类及基因型我们在一些蔬菜及豆科的牧草上已经取得了 些进步,但是对高等植物原生质体培养中有重要经济价值的植物种类的研究相对较少.这是限制高等植物 遗传操作开展及其在生产上应用的原因之一2)加强对原生质体再生植株无性系变异的细胞遗传学研究,比 如核质关系、不亲和性、细胞分裂的调控及细胞全能性的机理遗传物质的重组等生物学基础理论的研究.3) 选择应用先进的融合方法进行多种方式的融合,除对称融合外,还要注意不对称融合的研究.因此,今后在 进一步加强原生质体培养基础理论研究时.应将重点放在利用原生质体融合技术进行遗传性状的改良,以 获得优良性状的个体并通过无性途径固定下来 参考文献 [1 COCKNG E C. A method fer the 1. olation oi plant protoplasts and vacuoles [ J]. Nature 1960, 187: 927-929 [2 NAGATA T, TAKEBE 1. Cell well regeneration and cell division in isolated tobacco mesophyll protoplasts[J. Panta, 1970,92: 301 [3]刘继红,邓秀新植物原生质体非对称融合及其在育种上的应用U]生命科学,1999,1增刊):88 [4 GLROY S, JONES RL. Gibberellic acid and abscisic acid coordinately regulate cytoplasmic calcium and secretory activity in barely aleurone protoplasts J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1992, 89: 3 591-3995 [5 KNIGHTM R, ANTHONY KC, STEVEN M S. Transgenic plant aequorin reports the effects of touch and cold shock and elicitors on cytoplasmic calcium]. Nature, 1991, 352: 524 16 JEN SHEEN. Signal transduction in maize and Arabidopsis mesophyll protoplasts[J]. Pant Physiology, 2001, 1274): 1-446 [7]孙敬三,桂耀林植物细胞工程实验技术[M]北京:科学出版社,1995 [8] TAUIORUS T E, FOWKE L C. Somatic embryogenesis in conifers[J]. Can J Bot, 1991, 69: 1 873-1 899 [9] PATTA-OCHATT EM, ROWER J B. Advances in plant regeneration from apple protoplasts[J]. Acta Horticulture, 19905): 285 [10] NYAN M, WALLN A. Mant regeneation from trawberry( Fragaria Xananssa)mesophyll protoplasts []. Pant Physiol, 1998, 133 375-377 [11 WALLIN A, WEANDER M. Improved yield of apple leaf protoplasts from invitro cultured shoots by using very young leaves and add ing L-methionine to the shoot medium[J]. Plant Cell Tissue and Organ Culture, 1985, 5: 69-72 [12 HUANCARUNA- PERALES E, SHIBATE M. Pant regeneration from leaf protoplasts of apple[J]. Pant Cell lissue and Organ Cut ure,1993,34:7-76 [13]金晓玲,何平木本植物原生质体培养与融合研究进展[]浙江师范大学学报:自然科学版,2003,26(1):54·59 [14]沈前华,杨柏云,郭金平,等.大花蕙兰原生质体分离的影响因素研究[]江西农业学报199,8(1):36-40 [5]陈正华木本植物组织培养及其应用[M]北京高等教育出版社,1986 16]陆荣生,韩美丽.木本植物原生质体培养研究进展[].广西林业科学,1998,27(4):197-201. [17 OCHATTSJ, CASOO H. Shoot regeneration from leaf mesophyll protoplasts of wild pear (pyrus communis va pyraster L)J] Plant Physiol,1986,122:243-249 [18]夏镇澳.植物原生质体培养理论、技术研究进展].农业科学集刊,1995(2):1-6 [19]陈振光,林顺权,凌经天.果树原生质体培养及细胞融合的硏究进展[].福建农学院学报,199,19(1):102-113 [20 OCHATT SJ. Woody plant protoplast techology revisisted [J]. Acta Hbrticulturace, 1993, 336: 285-295 [21][西德]巴尔茨W,赖因哈德E,岑克MH植物组织培养及其在生物技术上的应用[M].夏镇奥译.北京:科学出版社 [22]孙勇如,安锡培.植物原生质体培养[M].北京:科学出版社,1991 [23 VON ARNOLD S, ERIKSSON T. A revised medium for growth of pea mesophyll protoplasts[J]. Pant Physiol, 1977, 39: 257-260 [24 UPADHYA M D. Isolation and culture of mesophyll protoplasts of potato( Salanum tuberosum L )[J]. Rotato Res, 1975, 18: 438 201994-2008ChinaAcademicJOurnalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp://www.cnki.net获得再生植株的植物种类不断增加 ,包括林木、观赏植物、药用植物、果树和作物等. 目前通过原生质体培养 获得再生的植株有 280 余种 [49 ] ,其中 20 余种是我国首先培养成功的. 虽然对植物原生质体的研究取得了很 大的进展 ,但是利用原生质体技术改良高等植物的遗传性状并将之运用于生产实践中还有很大距离. 今后 的任务为 :1) 进一步扩大原生质体培养材料的种类及基因型. 我们在一些蔬菜及豆科的牧草上已经取得了一 些进步 ,但是对高等植物原生质体培养中有重要经济价值的植物种类的研究相对较少. 这是限制高等植物 遗传操作开展及其在生产上应用的原因之一. 2) 加强对原生质体再生植株无性系变异的细胞遗传学研究 ,比 如核质关系、不亲和性、细胞分裂的调控及细胞全能性的机理、遗传物质的重组等生物学基础理论的研究. 3) 选择应用先进的融合方法进行多种方式的融合 ,除对称融合外 ,还要注意不对称融合的研究. 因此 ,今后在 进一步加强原生质体培养基础理论研究时. 应将重点放在利用原生质体融合技术进行遗传性状的改良 ,以 获得优良性状的个体并通过无性途径固定下来. 参考文献 : [1 ] COCKING E C. A method for the isolation of plant protoplasts and vacuoles[J ]. Nature ,1960 , 187 :927 - 929. [2 ] NAGATA T , TAKEBE I. Cell wall regeneration and cell division in isolated tobacco mesophyll protoplasts[J ]. Planta , 1970 , 92 :301 - 308. [3 ] 刘继红 ,邓秀新. 植物原生质体非对称融合及其在育种上的应用[J ]. 生命科学 ,1999 ,11(增刊) : 88 - 91. [4 ] GILROY S , JONES R L. Gibberellic acid and abscisic acid coordinately regulate cytoplasmic calcium and secretory activity in barely aleurone protoplasts[J ]. Proc Natl Acad Sci USA ,1992 ,89 : 3 591 - 3 995. [5 ] KNIGHT M R , ANTHONY K C , STEVEN M S. Transgenic plant aequorin reports the effects of touch and cold2shock and elicitors on cytoplasmic calcium[J ]. Nature ,1991 ,352 :524. [6 ] J EN SHEEN. Signal transduction in maize and Arabidopsis mesophyll protoplasts[J ]. Plant Physiology , 2001 ,127(4) : 1 - 446. [7 ] 孙敬三 ,桂耀林. 植物细胞工程实验技术[M]. 北京 :科学出版社 ,1995. [8 ] TAUTORUS T E , FOWKE L C. Somatic embryogenesis in conifers[J ]. Can J Bot ,1991 ,69 :1 873 - 1 899. [9 ] PATTA - OCHATT E M , POWER J B. Advances in plant regeneration from apple protoplasts[J ]. Acta Horticulture , 1990(5) :285 - 288. [10 ] NYMAN M , WALLIN A. Plant regeneation from trawberry (Fragaria ×ananssa) mesophyll protoplasts [J ]. Plant Physiol , 1998 ,133 : 375 - 377. [11 ] WALLIN A , WELANDER M. Improved yield of apple leaf protoplasts from invitro cultured shoots by using very young leaves and add2 ing L2methionine to the shoot medium[J ]. Plant Cell Tissue and Organ Culture ,1985 ,5 :69 - 72. [12 ] HUANCARUNA - PERALES E , SHIBATE M. Plant regeneration from leaf protoplasts of apple[J ]. Plant Cell Tissue and Organ Cul2 ture , 1993 , 34 : 71 - 76. [13 ] 金晓玲 ,何 平. 木本植物原生质体培养与融合研究进展[J ]. 浙江师范大学学报 :自然科学版 ,2003 , 26(1) :54 - 59. [14 ] 沈前华 ,杨柏云 ,郭金平 ,等. 大花蕙兰原生质体分离的影响因素研究[J ]. 江西农业学报 ,1996 ,8 (1) :36 - 40. [15 ] 陈正华. 木本植物组织培养及其应用[M]. 北京 :高等教育出版社 ,1986. [16 ] 陆荣生 ,韩美丽. 木本植物原生质体培养研究进展[J ]. 广西林业科学 ,1998 ,27(4) : 197 - 201. [17 ] OCHATT S J , CASO O H. Shoot regeneration from leaf mesophyll protoplasts of wild pear (pyrus communis va pyraster L.) [J ]. Plant Physiol ,1986 ,122 :243 - 249. [18 ] 夏镇澳. 植物原生质体培养理论、技术研究进展[J ]. 农业科学集刊 ,1995(2) :1 - 6. [19 ] 陈振光 ,林顺权 ,凌经天. 果树原生质体培养及细胞融合的研究进展[J ]. 福建农学院学报 ,1990 , 19(1) :102 - 113. [20 ] OCHATT S J . 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