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(1).离心机要置水平位置,以保证旋转轴垂直地球水平面。 (2).使用前应检查套环是否平衡(台称)。 (3).离心杯及其外套(离心管套)是否平衡(台称)。 (4).样品倾入离心杯后应与离心管套一起两两平衡,平衡后把它们放置于转子 的对称位置。 (5).盖好盖子,打开电源开关,调整离心时间。 (6).启动离心时转速应由小至大,缓慢升速(一般要 2~3min)。 (7).达到预定转速后再调整离心时间至预定时间(10min)。 (8).离心完成后要调整调速连杆至零位,同时关上电源。 (9).要等到转速为零时才能打开离心机盖,取出样品。 六、生物大分子制备的实验设计 (一)生物大分子制备的意义。 随着分子生物学研究的进展,人们不但要研究生物体内一种物质的结构与功能, 而且要研究所有物质的结构与功能。 只有掌握所有物质的结构与功能,才能阐明它们是如何生物合成又是如何加工的, 以最终阐明这些物质在什么阶段合成,它们的结构如何,它们在生命的生长发育和衰 老中的作用。 人类基因组计划的顺利完成以及后基因组计划的实施就是按照这样的思路而进行 的。 人类基因组计划——植物——水稻基因组计划——酵母细菌病毒的基因计划—— 蛋白质组学——目的是揭示生命活动的规律。可见,阐明生命不同物质结构与功能的 研究已成为可能。人类遗传性,非遗传性疾病的防治,肿瘤的成因及其防治已不是理 想,而将变为现实。 在人们的科学研究,生产活动中,往往会遇到一些现象,如比较同种物种的不同 个体,发现有一差异的 mRNA,差异的蛋白质等,环境因素影响也会出现这种现象, 那么人们对于掌握这一差异物质的功能就显得尤其迫切。所以生物大分子研究也成为 势在必行的重要内容。 而这些研究,总是以纯化这些大分子物质为前提的,所以同学们必须学习这部分 内容。 (二)生物大分子制备方法的特点 1. 生物材料组成非常复杂,常包括数百种甚至数千种化合物,各种化合物的形状, 大小,分子量和理化性质各不同,其中有不少化合物迄今还是未知物质,而且这 些化合物在分离时仍不断在新陈代谢中。 2. 有些化合物在材料中含量极微,只有万分之一,或是几十万分之一,甚至几百万 分之一。如脑垂体组织提取某些激素的释放因子,蚕的信息素,竹笋的竹笋素等 都是从几吨到十几吨才能得到几毫克的目的物。 3. 许多生物大分一旦离开生物体内环境,很快变性,破坏。因此在分离过程中必须 保护这些化合物的生理活性,这也是最难做到的一点。在分离中,过酸,过碱, 重金属离子,高温,剧烈的机械作用,强烈的辐射和体内自身酶的作用,均可破 坏这些分子的生理活性。故分离具生物活性物质,常用十分温和的条件,并尽可 能在较低温度和洁净环境下进行。 4. 生化分离方法几乎都在溶液中进行,各种参数(温度,pH 值,离子强度等)对溶 液中各种组成综合影响常常无法固定,以致许多实验设计理论性不强,实验结果 往往有很大的经验成分。因此一个实验的重复性的建立,从材料至方法直至各种(1).离心机要置水平位置,以保证旋转轴垂直地球水平面。 (2).使用前应检查套环是否平衡(台称)。 (3).离心杯及其外套(离心管套)是否平衡(台称)。 (4).样品倾入离心杯后应与离心管套一起两两平衡,平衡后把它们放置于转子 的对称位置。 (5).盖好盖子,打开电源开关,调整离心时间。 (6).启动离心时转速应由小至大,缓慢升速(一般要 2~3min)。 (7).达到预定转速后再调整离心时间至预定时间(10min)。 (8).离心完成后要调整调速连杆至零位,同时关上电源。 (9).要等到转速为零时才能打开离心机盖,取出样品。 六、生物大分子制备的实验设计 (一)生物大分子制备的意义。 随着分子生物学研究的进展,人们不但要研究生物体内一种物质的结构与功能, 而且要研究所有物质的结构与功能。 只有掌握所有物质的结构与功能,才能阐明它们是如何生物合成又是如何加工的, 以最终阐明这些物质在什么阶段合成,它们的结构如何,它们在生命的生长发育和衰 老中的作用。 人类基因组计划的顺利完成以及后基因组计划的实施就是按照这样的思路而进行 的。 人类基因组计划——植物——水稻基因组计划——酵母细菌病毒的基因计划—— 蛋白质组学——目的是揭示生命活动的规律。可见,阐明生命不同物质结构与功能的 研究已成为可能。人类遗传性,非遗传性疾病的防治,肿瘤的成因及其防治已不是理 想,而将变为现实。 在人们的科学研究,生产活动中,往往会遇到一些现象,如比较同种物种的不同 个体,发现有一差异的 mRNA,差异的蛋白质等,环境因素影响也会出现这种现象, 那么人们对于掌握这一差异物质的功能就显得尤其迫切。所以生物大分子研究也成为 势在必行的重要内容。 而这些研究,总是以纯化这些大分子物质为前提的,所以同学们必须学习这部分 内容。 (二)生物大分子制备方法的特点 1. 生物材料组成非常复杂,常包括数百种甚至数千种化合物,各种化合物的形状, 大小,分子量和理化性质各不同,其中有不少化合物迄今还是未知物质,而且这 些化合物在分离时仍不断在新陈代谢中。 2. 有些化合物在材料中含量极微,只有万分之一,或是几十万分之一,甚至几百万 分之一。如脑垂体组织提取某些激素的释放因子,蚕的信息素,竹笋的竹笋素等 都是从几吨到十几吨才能得到几毫克的目的物。 3. 许多生物大分一旦离开生物体内环境,很快变性,破坏。因此在分离过程中必须 保护这些化合物的生理活性,这也是最难做到的一点。在分离中,过酸,过碱, 重金属离子,高温,剧烈的机械作用,强烈的辐射和体内自身酶的作用,均可破 坏这些分子的生理活性。故分离具生物活性物质,常用十分温和的条件,并尽可 能在较低温度和洁净环境下进行。 4. 生化分离方法几乎都在溶液中进行,各种参数(温度,pH 值,离子强度等)对溶 液中各种组成综合影响常常无法固定,以致许多实验设计理论性不强,实验结果 往往有很大的经验成分。因此一个实验的重复性的建立,从材料至方法直至各种
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