实验二 叶绿体的分离与观察和细胞大小的测量 一. 实验原理 1.组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。 一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心 力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大 小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，就能够使非均 一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即 可获得各种亚细胞组分。 2. 应用显微镜的成像原理，同时借助显微镜的镜台测微尺和目镜测微尺， 两尺配合使用，进行测量和运算，得出细胞的大小。 二.试剂与器械 1. 器材 : 普通离心机、组织捣碎机、粗天平、荧光显微镜。烧杯2个, 250ml量筒1个, 滴管20支, 10ml刻度离心管20支, 试管架5个，纱布若干， 无荧光载片和盖片各4片。 2. 试剂: 0.35mol/L氯化钠溶液，0.01%吖啶橙(acridine orange)。实验二 叶绿体的分离与观察和细胞大小的测量 一. 实验原理 1.组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。 一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心 力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大 小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，就能够使非均 一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即 可获得各种亚细胞组分。 2. 应用显微镜的成像原理，同时借助显微镜的镜台测微尺和目镜测微尺， 两尺配合使用，进行测量和运算，得出细胞的大小。 二.试剂与器械 1. 器材 : 普通离心机、组织捣碎机、粗天平、荧光显微镜。烧杯2个, 250ml量筒1个, 滴管20支, 10ml刻度离心管20支, 试管架5个，纱布若干， 无荧光载片和盖片各4片。 2. 试剂: 0.35mol/L氯化钠溶液，0.01%吖啶橙(acridine orange)