100第8章微生物速传 20,细茵基因转移的3种方式（接合、转导、转化）都可以用来进行作图。因用接合作用（中 断杂交作图缺三高度的分解力。不德用干相隔很近的基闲的定帝，所以完整的贵传图兽是 用几种作图技术绘制的。通常是将中断杂交数据和共转导、共转化研究结合起来，后者可对 十分邻近的基因进行更精确的定位。日前对大肠杆菌的染色体己定位了1000多个基因 21.虽然我们可以从绘制的遗传图谱中获得某些信息，但大量认识还必须通过用其基因 组的实际的核苷酸序列来与微生物的遗传图谱进行比较而获得。主要采用一种称之为“全基 易a作视打断议天的方法米进标·简达加下声诚 、基 大小或更小，这些片段与质粒载体结合，产 生质粒克降文库，(2)制备这些克隆和提纯DNA以后，数干个细菌DNA片段被自动测序， 通常是用特殊的染料标记引物。这个程序的特点是几乎基因组的所有片段都被测序几次，以 增加最后结果的精确性。(3)用专门的计算机程序将已测序的DNA片段通过片段之间核苷酸 字列重叠的比较，将其装配成比较长的DNA序列。如果这些序列在其末端重叠或有相同的 末端)，那么两个片段连在一起形成更长的一段DNA。这种重叠比较过程导致一系列大的相 邻核背酸序列或重叠群(contig).4)最后 ,将这些 重叠群按合适的顺序排队 填补两个重叠 群之间可能留下的缺口(gp以，从而形成完整的基因组序列。 22.酿酒酵母是以单倍体或二倍体状态存在，单倍体分别是两种接合型，称之为Q和a, a和a细胞的融合便产生了二倍体细胞〔a/).大多数酵母菌株含有一种称之为2m的质 粒，这是目前研究得比较深入且具有广泛应用价值的质粒。 23. 在生物进化过程 微生物 形成了愈来念完普的代谢讽节机制 使细胞内复杂的生 物化学反应能高度有序地进行和对外界环境条件的或变迅速作出反应 因此，处于平衡生长 进行正常代谢的微生物不会有代谢产物的积累。而微生物育种的目的就是要人为地使某种代 谢产物过最积累，把生物合成的代谢途径朝人们所希望的方向加以引导，或者促使细胞内发 生基因的重新组合伏化遗传性状，实现人为控制微生物。获得我们所需要的高产、优质和低 耗的闲种。为了实现这一目的必须设法解除或突破微生物的代谢调节控制，进行优良性状的 组合， 或者利用基因 程的方法人为改造或构建我们所需要的菌株 24.虽然微生物可产生大量十分有价值的产物，但是它们完善的调节机制限刺细胞只月 生够它们自身需要的少量产物，它们是十分“节约”的。微生物学家必须设法使它们变成“浪 费型”，才能从它们那儿得到我们所需要的代谢产物。长期实践的结果表明，通过选育各种 突变株是达到这一目的的重要策略。包括营养缺陷型突变株，抗阻過和抗反馈突变型，抗性 突变型等。 25.体内基因重组是指重组过程发生在细胞内。体内基因重组育种是指采用接合、转化 转导和原生质体融合等遗传学方法和技术使微生物细胞内发生基因重组，以增加优良性状的 组合，或者导致多倍体的出现，从而获得优良菌株的一种育种方法， 主要参考书目 l.Prescott LM,HarleyJP,.Klein DA.微生物学.第5版.中文版.沈萍，彭珍荣主译.北 京：高等教育出版杜 2003.227-36 2.沈.微生物遗传学.武汉：武汉大学出版社，1995 3.Talaro K P.Foundations in Microbiology.5th ed.New York:MeGraw-Hill companies.2005 沈萍)