κ-角叉菜胶凝固后,再用戊二醛与己二胺或戊二醛与赖氨酸交联处理,强度和稳定性更妤 ④琼脂包埋 此法可包埋细胞。热溶冷凝。 ⑤胶原和明胶包埋 胶原是一种蛋白质,是胶原纤维的组成成分,在动物的皮肤、骨头、腱中含量很高。胶原 有纤维性,容易制成膜,将酶加到胶原悬浮液中,铺膜,干燥,就可以制成固定化酶膜 明胶是胶原的部分水解产物,溶于水。明胶通过戊二醛交联可成为一种不溶性固定化载体 酶或细胞也能通过戊二醛与明胶网架结合,组成一种复合体,而不是单纯的包埋。此法的优点是 载体强度好,无毒害,价格低,取材容易,包埋的酶或细胞不易脱落:缺点是戊二醛交联时酶容 易失活。 923.2微囊包埋法: ①界面沉淀法 这是利用某些高聚物在水相和有机相的界面上溶解度极低而形成膜将酶包埋的方法。一般 是先将含保护剂的酶液在与水不互溶的有机相中乳化,在油溶性的表面活性剂存在下形成油包水 的微滴,微滴的大小由搅拌的速度和时间决定。再将溶于有机溶剂的高聚物加入乳化液中,然后 加入一种不溶解高聚物的有机溶剂,使高聚物在油水界面上沉淀、析岀、形成膜,将酶包埋。此 法条件温和,酶失活少,但要完全除去膜上残留的有机溶剂很麻烦。 酶保护剂常用的有牛血清白蛋白(BSA)、血红蛋白、聚乙烯亚胺(PEI)等;有机相一般 是醚、环己烷、甲苯等:高聚物是硝酸纤维素、乙酸纤维素、异丁烯橡胶等:表面活性剂可以用 下面是用异丁烯橡胶微囊包埋过氧化氢酶的方法 A.准备下列四种混合物: a.26g乳化剂Span85,25ml环己烷 b.lm50mmo/L的磷酸缓冲液,pH7.0,含过氧化氢酶650单位; c.0.lg异丁烯橡胶,50m环己烷,搅拌1~2小时使其完全溶解 d.15ml环己烷,10ml菜油。 B3→ B.把混合液a加入到混合液b中,不断搅拌 C.再加入混合液c,不断搅拌 D.边搅拌边加入混合液d 防哥 E.抽真空至26mmlg柱,在连续搅拌下环己烷蒸发,蒸发不能太快 F.离心含有微囊的油相,倾去上部油层,加入15mL磷酸缓冲液,再悬浮颗粒,离心除去上清8 κ-角叉菜胶凝固后，再用戊二醛与己二胺或戊二醛与赖氨酸交联处理，强度和稳定性更好。 ④ 琼脂包埋： 此法可包埋细胞。热溶冷凝。 ⑤ 胶原和明胶包埋： 胶原是一种蛋白质，是胶原纤维的组成成分，在动物的皮肤、骨头、腱中含量很高。胶原 有纤维性，容易制成膜，将酶加到胶原悬浮液中，铺膜，干燥，就可以制成固定化酶膜。 明胶是胶原的部分水解产物，溶于水。明胶通过戊二醛交联可成为一种不溶性固定化载体。 酶或细胞也能通过戊二醛与明胶网架结合，组成一种复合体，而不是单纯的包埋。此法的优点是 载体强度好，无毒害，价格低，取材容易，包埋的酶或细胞不易脱落；缺点是戊二醛交联时酶容 易失活。 9.2.3.2 微囊包埋法： ① 界面沉淀法： 这是利用某些高聚物在水相和有机相的界面上溶解度极低而形成膜将酶包埋的方法。一般 是先将含保护剂的酶液在与水不互溶的有机相中乳化，在油溶性的表面活性剂存在下形成油包水 的微滴，微滴的大小由搅拌的速度和时间决定。再将溶于有机溶剂的高聚物加入乳化液中，然后 加入一种不溶解高聚物的有机溶剂，使高聚物在油水界面上沉淀、析出、形成膜，将酶包埋。此 法条件温和，酶失活少，但要完全除去膜上残留的有机溶剂很麻烦。 酶保护剂常用的有牛血清白蛋白（BSA）、血红蛋白、聚乙烯亚胺（PEI）等；有机相一般 是醚、环己烷、甲苯等；高聚物是硝酸纤维素、乙酸纤维素、异丁烯橡胶等；表面活性剂可以用 Span 85。 下面是用异丁烯橡胶微囊包埋过氧化氢酶的方法： A．准备下列四种混合物： a．2.6g 乳化剂 Span 85，25ml 环己烷； b．1ml 50mmol/L 的磷酸缓冲液，pH7.0，含过氧化氢酶 650 单位； c．0.1g 异丁烯橡胶，50ml 环己烷，搅拌 1～2 小时使其完全溶解； d．15ml 环己烷，10ml 菜油。 B．把混合液 a 加入到混合液 b 中，不断搅拌； C．再加入混合液 c，不断搅拌； D．边搅拌边加入混合液 d ； E．抽真空至 26mmHg 柱，在连续搅拌下环己烷蒸发，蒸发不能太快； F．离心含有微囊的油相，倾去上部油层，加入 15mlL 磷酸缓冲液，再悬浮颗粒，离心除去上清