华中农业大学创建国家精品课程—细胞工程学文本教案(第六章) 主讲教师:柳俊博士、教授 有些逆境反应对原生质体制备和培养是不利的,例如在甜菜原生质体制备时由于某些酶 的活性增强使得形成类脂过氧化物( (lipid peroxides),结果引起原生质膜的氧化损伤。而 对马铃薯原生质体活力的损伤乃是由于乙烯产生所致( Perl aet al,191)。 2.修复机理 原生质体分离时会丢失一些不同的细胞结构。使原生质体中细胞骨架的组分、结构、方 向发生变化,最常见的是引起细胞极性的改变( Simmond h,1991),同时也会干扰质膜 的蛋白质系统。 原生质体修复其质膜及其中的蛋白质组分的能力,细胞壁再生的能力及细胞骨架的修复 修复和调整能力都对它们能否进一步发育有很大影响。 3.细胞脱分化与细胞分裂 ●分离的原生质体原来的细胞状态常常会影响脱分化的进行 细胞在培养初期的一些变化,如液泡消失、细胞体积增加、细胞质变浓,核蛋白体增加 等,与此同时DNA开始复制,随后染色质变浓,原生质体脱分化成为类似分生组织状 态的细胞。 原生质体培养初期的细胞分裂至少涉及到以下多个因子:细胞壁的再生、细胞骨架的修 复与调整、原生质体分离时细胞所处的周期(G2期细胞具有较高的分裂频率)。另 外,细胞壁的再生与DNA的合成协调与否也会影响细胞分裂。 五、原生质体研究的趋势 低密度和单个原生质体培养; 原生质体衍生系统如微小原生质体、胞质体、核质体的利用 单倍配子体如花粉原生质体培养; 计算机控制系统、流式细胞光度计等技术的应用。 思考题 1.原生质体、亚原生质体、微小原生质体和原生质球的概念 2.为什么原生质体要培养在等渗培养基中? 3.影响原生质体培养的主要因素 4.原生质体的培养方法有哪些?各有何优缺点。 5.性细胞原生质体的种类、分化途径及应用领域。 6.为什么说原生质体培养系统是现代生物技术的载体?华中农业大学创建国家精品课程——细胞工程学 文本教案(第六章) 主讲教师：柳俊博士、教授  有些逆境反应对原生质体制备和培养是不利的，例如在甜菜原生质体制备时由于某些酶 的活性增强使得形成类脂过氧化物(lipid peroxides)，结果引起原生质膜的氧化损伤。而 对马铃薯原生质体活力的损伤乃是由于乙烯产生所致(Perl Aet al.,1991)。 2．修复机理  原生质体分离时会丢失一些不同的细胞结构。使原生质体中细胞骨架的组分、结构、方 向发生变化，最常见的是引起细胞极性的改变(Simmond D H., 1991)，同时也会干扰质膜 的蛋白质系统。  原生质体修复其质膜及其中的蛋白质组分的能力，细胞壁再生的能力及细胞骨架的修复 修复和调整能力都对它们能否进一步发育有很大影响。 3．细胞脱分化与细胞分裂  分离的原生质体原来的细胞状态常常会影响脱分化的进行。  细胞在培养初期的一些变化，如液泡消失、细胞体积增加、细胞质变浓，核蛋白体增加 等，与此同时 DNA 开始复制，随后染色质变浓，原生质体脱分化成为类似分生组织状 态的细胞。  原生质体培养初期的细胞分裂至少涉及到以下多个因子：细胞壁的再生、细胞骨架的修 复与调整、原生质体分离时细胞所处的周期（G2 期细胞具有较高的分裂频率）。另 外，细胞壁的再生与 DNA 的合成协调与否也会影响细胞分裂。 五、原生质体研究的趋势  低密度和单个原生质体培养；  原生质体衍生系统如微小原生质体、胞质体、核质体的利 用；  单倍配子体如花粉原生质体培养；  计算机控制系统、流式细胞光度计等技术的应用。 思考题 1．原生质体、亚原生质体、微小原生质体和原生质球的概念。 2．为什么原生质体要培养在等渗培养基中？ 3．影响原生质体培养的主要因素。 4．原生质体的培养方法有哪些？各有何优缺点。 5．性细胞原生质体的种类、分化途径及应用领域。 6．为什么说原生质体培养系统是现代生物技术的载体？