试管编号 麦芽糖标准液(m)|00204081.21.6|2.0 蒸馏水(mL) 201.81.61.208|040 麦芽糖浓度(pg/mL)101020406080100 3.α-淀粉酶活力测定 (1)取6支干净的具塞刻度试管,编号1-6,1-3为对照,4-6为测定管; (2)每管中加入1mL淀粉酶原液,在70℃±0.5℃下准确加热15min,以钝化β-淀粉酶,立即冰 浴 (3)每个试管中加入0.1 mol/L pH5.6的柠檬酸缓冲液1mL (4)在1-3为对照管中分别加入4mL04mo/ NAoH溶液,以钝化酶活,再加入1%淀粉溶液2 mL,混匀; (5)将4-6测定管置于40℃恒温水浴中预热15min后,向其中加入40℃恒温水浴中预热的1%淀 粉溶液2mL,混匀并立即放回40℃恒温水浴中保温5min,迅速向试管中加入4mL0.4mol/l NaOH溶液,备下一步测糖含量 (6)取以上各管中的溶液2mL分别加入到10mL具塞试管中,另取一管加2mL柠檬酸缓冲液作 为比色测定时候的空白调零管,再分别加入3,5-二硝基水杨酸2mL,摇匀,置沸水浴中煮沸5 min,取出后流水冷却,在540nm波长下比色测定,记录数据于表5-5中,根据标准曲线求出麦芽糖 浓度,分别求出3个对照管与测定管中麦芽糖浓度的平均值,分别记作A'与A 4.∝-淀粉酶与β-淀粉酶总活力测定: (1)取6支干净的具塞刻度试管,编号7-12,7-9为对照,10-12为测定管 (2)每管中加入1mL淀粉酶稀释液; 以下按照α-淀粉酶活力测定中的步骤(3)-(6)进行,记录数据于表5-5中,分别求出3个对照管与 测定管中麦芽糖浓度的平均值,分别记作B′与B: 表5-5标准麦芽糖溶液配制 α-淀粉酶活力 (a+β)-淀粉酶总活力 对照 测定 对照 测定 试管编号12 OD540nm 麦芽糖浓度 (ug/mL) 平均麦芽糖浓 A 度(pg/mL)试管编号 1 2 3 4 5 6 7 麦芽糖标准液（mL） 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 蒸馏水（mL） 2.0 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0 麦芽糖浓度（μg/mL） 0 10 20 40 60 80 100 3. α-淀粉酶活力测定： (1) 取6支干净的具塞刻度试管，编号1-6，1-3为对照，4-6为测定管; (2) 每管中加入1 mL 淀粉酶原液，在70℃±0.5℃下准确加热15 min，以钝化β-淀粉酶，立即冰 浴； (3) 每个试管中加入0.1 mol/L pH 5.6的柠檬酸缓冲液 1 mL； (4) 在1-3为对照管中分别加入4 mL 0.4 mol/LNaOH溶液， 以钝化酶活，再加入1%淀粉溶液2 mL， 混匀； (5) 将4-6测定管置于40℃恒温水浴中预热15 min后，向其中加入40℃恒温水浴中预热的1%淀 粉溶液2 mL，混匀并立即放回40℃恒温水浴中保温5 min，迅速向试管中加入4 mL 0.4 mol/L NaOH溶液，备下一步测糖含量。 (6) 取以上各管中的溶液2 mL分别加入到10 mL具塞试管中，另取一管加2 mL柠檬酸缓冲液作 为比色测定时候的空白调零管，再分别加入3，5-二硝基水杨酸2 mL，摇匀，置沸水浴中煮沸5 min，取出后流水冷却，在540nm波长下比色测定，记录数据于表5-5中，根据标准曲线求出麦芽糖 浓度，分别求出3个对照管与测定管中麦芽糖浓度的平均值，分别记作A’与A； 4. α-淀粉酶与β-淀粉酶总活力测定： (1) 取6支干净的具塞刻度试管，编号7-12，7-9为对照，10-12为测定管; (2) 每管中加入1 mL淀粉酶稀释液; 以下按照α-淀粉酶活力测定中的步骤(3)-(6)进行，记录数据于表5-5中，分别求出3个对照管与 测定管中麦芽糖浓度的平均值，分别记作B’与B； 表5-5 标准麦芽糖溶液配制 α-淀粉酶活力 (α+β) -淀粉酶总活力 对照 测定 对照 测定 试管编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 OD540nm 麦芽糖浓度 （μg/mL） 平均麦芽糖浓 度（μg/mL） A’ A B’ B