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Sac Il(Sst In) O() G· ICGAC Sfi l GGCCNNNN· NGGCC L Sma I CCC·GGG K Sph I Tag I L T· CTAGA L Xho I C· TCGAG Xma I(PSpA D) C· CCGGO mn GAANN· NATTO 注:R为嘧呤,Y为嘧啶,N为任何碱 基 缓冲液组成为: OmM Tris-CI 10mM Tris-Cl pH8 pH7. 4 g 20mMKCI ImMDTT OmM Tris-Cl 10mM Tris-Cl pH7. 4 H74 10mM MgCl2 10mM MgCl2 ImMDTI ImMDTT 150mM NaCl 10mM Tris- pH7. 4 10mM MgCl2 I nMDA 1.3.23限制酶切反应 DNA分子在限制酶的作用下,识 别特定的切割位点,把DNA切割成特 定大小和数量的片段。酶切反应需要在 定的条件下进行(如温度、时间、离 子浓度等) 13.2.3.1限制酶切反应Sac II (Sst II)1 CCGC·GG O(L) Sal I G·TCGAC H Sfi I GGCCNNNN·NGGCC L Sma I CCC·GGG K Sph I GCATC·C M Stu I AGG·CCT L Taq I T·CGA L Xba I T·CTAGA L Xho I C·TCGAG L Xma I(PspA I)1 C·CCGGG O Xmn I GAANN·NNTTC O 注:R 为嘧呤,Y 为嘧啶,N 为任何碱 基 缓冲液组成为: K: 10mM Tris-Cl pH8 O: 10mM Tris-Cl pH7.4 10mM MgCl2 10mM MgCl2 20mM KCl 1mM DTT L: 50mM NaCl M: 100mM NaCl 10mM Tris-Cl pH7.4 10mM Tris-Cl pH7.4 10mM MgCl2 10mM MgCl2 1mM DTT 1mM DTT H: 150mM NaCl 10mM Tris-Cl pH7.4 10mM MgCl2 1 nM DTT 1.3.2.3 限制酶切反应 DNA 分子在限制酶的作用下,识 别特定的切割位点,把 DNA 切割成特 定大小和数量的片段。酶切反应需要在 一定的条件下进行(如温度、时间、离 子浓度等) 1.3.2.3.1 限制酶切反应
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