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加完样后接通电源,负极在上,正极在下。调节电流,开始时用1一2毫安/ 管,电泳一2分钟,再升高电流到约3一5毫安/管,不要一开始电流很高。电洗 最好不超过5毫安, 以免产 热过多 必要时应进行冷却或在冷库内进行 当指示染料迁移到凝胶柱的下端附近时就可停止电泳,关闭电源,取出玻管。 缓冲液可再行使用,但上下槽缓冲液不能混淆,因下槽缓冲液中已混人催化 剂及氯离子(快离子),如将它当作上槽液就要影响电泳效果。 5轻胶的取出 将一针头长约10厘米的注射器吸满水。将针头插入凝胶与管壁之间,并紧则 管壁,一面注入水一面慢慢旋转玻管并推针前进,靠水流压力和润滑作用使玻窄 内壁与凝胶分开,待水从玻管一端流出时,再慢授将针头退出。然后去掉针头, 用注射器向玻管中快速注射水,将凝胶压出玻管。如凝胶浓度较高,取出困难, 可用10%的甘油水溶液代替水注入。一般剥胶方向是从浓缩胶端开始。 6.固定 为防止凝胶柱内已分离成分的扩散,需进行固定。方法是:把剥出的凝胶村 浸泡在7%乙酸或12.5%三氯乙酸的水溶液中几分钟:或浸泡在用7%乙酸或 12.5%三氯乙酸液配制的染色液中,同时进行固定和染色。 7色 在6%乙酸(含1%考马斯蓝)中染色30min,用甲醇:水:浓氨水(64:36: 1)脱色1-2天。加完样后接通电源,负极在上,正极在下。调节电流,开始时用 l-2 毫安/ 管,电泳 l—2 分钟,再升高电流到约 3-5 毫安/管,不要一开始电流很高。电流 最好不超过 5 毫安,以免产热过多,必要时应进行冷却或在冷库内进行。 当指示染料迁移到凝胶柱的下端附近时就可停止电泳,关闭电源,取出玻管。 缓冲液可再行使用,但上下槽缓冲液不能混淆,因下槽缓冲液中已混人催化 剂及氯离子(快离子),如将它当作上槽液就要影响电泳效果。 5.凝胶的取出 将一针头长约 10 厘米的注射器吸满水。将针头插入凝胶与管壁之间,并紧贴 管壁,一面注入水一面慢慢旋转玻管并推针前进,靠水流压力和润滑作用使玻管 内壁与凝胶分开,待水从玻管一端流出时,再慢慢将针头退出。然后去掉针头, 用注射器向玻管中快速注射水,将凝胶压出玻管。如凝胶浓度较高,取出困难, 可用 10%的甘油水溶液代替水注入。一般剥胶方向是从浓缩胶端开始。 6.固定 为防止凝胶柱内已分离成分的扩散,需进行固定。方法是:把剥出的凝胶柱 浸泡在 7%乙酸或 12.5%三氯乙酸的水溶液中几分钟;或浸泡在用 7%乙酸或 12.5%三氯乙酸液配制的染色液中,同时进行固定和染色。 7.染色 在 6%乙酸(含 1%考马斯蓝)中染色 30min,用甲醇:水:浓氨水(64:36: 1)脱色 1-2 天
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