(2)如待检材料是皮张、兽毛等，可采用冷浸法。先将样品高压灭菌30mi后，皮张剪 为小块并称重，加5-10倍的0.5%石炭酸生理盐水，置室温浸泡10-24h。用滤纸过滤2-3 次，使之呈清明的液体，此即为待检抗原。 2.加样：取3支口径0.4cm的小试管，在其底部各加约0.1ml的炭疽沉淀素血清（用 毛细滴管加，注意液面勿有气泡)。取其1支，用毛细滴管将待检抗原沿着管壁轻轻加入使 重叠在炭疽沉淀素血清之上，上下两液间有一整齐的界面，注意勿产生气泡。另2支小试管， 一支加炭箱沉淀抗原，另一支加生理盐水，方法同上，作为对照。 3.结果判定：5-l0加内判定结果，上下重叠两液界面上出现乳白色环者，为炭疽刚 性。对照组中，加炭疽沉淀抗原者应出现白环，而加生理盐水者应不出现白环。 4.注意：观察结果时，可将一只手放在小试管对测的适当位置上遮挡光线，有利于看 到白色沉淀环。 (二)琼脂扩散沉淀试验 琼脂扩散沉淀试验(Agar gel precipitation test,AGPT)是沉淀反应的一种形式。物质 自由运动形成扩散现象，扩散可以在各种介质中进行。1%琼脂凝胶形成网状构架，空隙中 是98%-99%的水，允许分子量在200ku以下分子通过。绝大多数可溶性抗原和抗体的分子 量在200ku以下，因此可以在琼脂凝胶中自由扩散，所受阻力甚小。二者在琼脂凝胶中相遇， 在最适比例处结合成复合物，此复合物因颗粒较大而不能扩散，故形成沉淀带。 本试验可用已知抗体检测样品中的抗原，也可用已知抗原检测血清样品中的抗体。 1.琼脂板制各：称取1g琼脂粉，加入100ml生理盐水或8.5%aC1溶液（贪类），煮 沸使之溶解。待溶解的琼脂温度降至60℃左右时倒入平皿中，厚度为2-3m。 2.打孔：用打孔器在琼脂凝胶板上按7孔梅花图案打孔，孔径约3-5mm,中心孔和周 围孔间的距离约为3-5mm。挑出孔内琼脂凝胶，注意不要挑破孔的边缘。 3封底：在火焰上缓缓加热，使孔底琼脂凝胶微微融化，以防止孔底边缘渗漏。 4,加样：以毛细滴管（或加样器）将样品加入孔内，注意不要产生气泡，以加满为度。 (1)血清流行病学调查：将禽流感琼扩抗原置中心孔，周围1、3、5孔加禽流感阳性 血清，2、4、6孔分别加待检鸡血清，每加一个样品应换一个滴头。 (2)抗血清效价测定：将猪血清（抗原）加入中心孔，将兔抗猪1gG(抗体)作2倍 比稀释，即1：2、1：4、1：8、1：16、1：32等，分别加至周围孔中。或者是将小鹅瘟琼扩抗 原加入中心孔，周围孔加入1：2、1：4、1：8、1：16、1：32等稀释的小鹅瘟抗血清