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4.培养工程菌 方法:①补料分批培养②连续培养③透析培养④固定化培养⑤髙密度培养等 5产物分离纯化 工程细菌所表达出的蛋白质组成 发酵液 成分复杂,且目的产物在初始物料 细胞分离 胞外产物→浓缩→初步纯化→高度纯化→产品 中含量很低,稳定性差,纯度底。 为了获得高纯度、可供药用有生物 固液分离 活性的蛋白质,必须对基因工程药包含 体细胞碎片→浓缩→初步纯化→高度纯化→制剂→产品 物进行一定的分离和纯化。 变性除膜 产物分离纯化步骤如图。 复性→浓缩→初步纯化→高度纯化→制剂→产品 技术应用 产物分离纯化步骤 1.基因工程胰岛素 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取, 100kg胰腺只能提取4-5g 的胰岛素,产量低且价格高。将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养 液就能生产100g胰岛素,且降低了30%-50%的价格。 2基因工程干扰素 基因工程人干扰素α-2b(安达芬)是我国第一个国产化基因工程人干扰素,具 有抗病毒,抑制肿瘤细胞增生,调节人体免疫功能的作用,广泛应用于病毒性疾 病治疗和多种肿瘤的治疗,是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤 生物治疗的主要药物 3其他基因工程药物 人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等 四、技术的优缺点 优点:1.工程菌生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产 2.产量大,且降低生产成本 缺点:转基因生物的安全性有待确定,如食品安全,生物安全,环境安全等。4.培养工程菌 方法:①补料分批培养②连续培养③透析培养④固定化培养⑤高密度培养等 5.产物分离纯化 工程细菌所表达出的蛋白质组成 成分复杂,且目的产物在初始物料 中含量很低,稳定性差,纯度底。 为了获得高纯度、可供药用有生物 活性的蛋白质,必须对基因工程药 物进行一定的分离和纯化。 产物分离纯化步骤如图。 三、技术应用 1.基因工程胰岛素 胰岛素是治疗糖尿病的特效药,长期以来只能从猪、牛等动物的胰腺中提取, 100kg 胰腺只能提取 4-5g 的胰岛素,产量低且价格高。将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每 2000L 培养 液就能生产 100g 胰岛素,且降低了 30%-50%的价格。 2.基因工程干扰素 基因工程人干扰素α-2b(安达芬)是我国第一个国产化基因工程人干扰素,具 有抗病毒,抑制肿瘤细胞增生,调节人体免疫功能的作用,广泛应用于病毒性疾 病治疗和多种肿瘤的治疗,是当前国际公认的病毒性疾病治疗的首选药物和肿瘤 生物治疗的主要药物。 3.其他基因工程药物 人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等。 四、技术的优缺点 优点:1.工程菌生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。 2.产量大,且降低生产成本。 缺点:转基因生物的安全性有待确定,如食品安全,生物安全,环境安全等。 产物分离纯化步骤
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