种沉淀即三聚甲醛,是甲醛的一种聚合形式(加热可重新分解成甲醛)。商品福尔马 林用甲醇阻止聚合作用。有时由于溶液不纯或甲醛氧化产生的甲酸成分使溶液呈酸 性,酸性的甲醛溶液使标本嗜染酸性、严重时可导致细胞核的嗜酸性染色。因此,在 备用的甲醛中宜放入小量的碳酸镁或碳酸钠作为中和剂。如果每100毫升的福尔马林 固定液中加入5ml的吡啶,则可调整PH为7。不过,这些方法不能永久保持其PH值; 欲望使其长期保持中性,则需以磷酸缓冲液作溶剂进行配制。其配制方法如下: 10%福尔马林1000ml 磷酸二氢钠(NaH2PO4)4g 磷酸氢二钠( NaHC4)6.5g 固定小的组织块数小时即可达到固定要求。如需要快速固定时,可加温到70 0℃,经过10分钟即可达到固定要求。在甲醛溶液中短时固定的标本,冲洗时间在 10分钟至2小时即可,但固定时间较长的标本需要较长时间的流水冲洗。一般要冲洗 24小时,甚至延长48小时,否则,由于甲酸的沉淀将会影响染色的结果 甲醛能保存脂肪和类脂体,对染色体,线粒体,高尔基体,具有良好的固定作用 经甲醛固定的陈旧组织,尤以多血的肝脾组织内常可出现棕黑色的福尔马林色素 颗粒,这种色素不溶于水,酒精及丙酮等,如欲与含铁血黄素加以区别,可用普鲁士 兰反应进行鉴别。福尔马林色素不含有铁,因此,福尔马林色素呈阴性反应,用中性 或微碱性福尔马林固定的效果能显著增加对铁离子的检出速度且可完全避免福尔马 林色素的形成。此外也可以使用其他试剂以浸洗方法除去福尔马林色素的沉淀,如 (1)苦味酸饱和酒精(90%)溶液浸洗30分钟后经70%酒精再水洗后进行染色。 (2)什端氏( Schrade)法 70%酒精200ml 28%氨水1ml 将石蜡切片在脱蜡以后放于上述液体中30分钟,再用流水冲洗,而后染色。若 甲醛产生的色素沉淀仍未被其洗去,则可在 Schrade氏液中延长时间。此法并不损害 组织。 (3)费罗氏( Verocay)法 0%酒精100ml 1%KOH 11 将切片在脱蜡至80%酒精后,浸入上液10分钟,再流水冲洗5分钟,入80%酒 精之后水洗染色 福尔马林固定的标本,经酒精脱水收缩较大,是其缺点。 酒精(C2HOH 可单独用作固定液;亦可作混合固定液,因为酒精(乙醇)是一种还原剂,所以 不可与铬酸,重铬酸钾或锇酸等氧化剂相混合使用。在氧量不足时酒精易氧化成乙醛 氧量充足则能生成酯酸,所以在正常情况下,酒精是偏酸性试剂。 酒精为常用的有机溶剂,能溶解多种有机物,高浓度酒精能凝固白蛋白,球蛋白 和核蛋白,对肝糖有固定作用,核蛋白和肝糖经酒精固定成水溶性状态,因此,经酒 精固定的标本如果固定后用水洗涤,则核着色欠佳,肝糖也将被水解。作为一种脂溶 剂,浓度在50%以上的酒精可溶解脂肪和类酯体,因此,对脂类的证明,高尔基氏体 线粒体等染色不宜使用酒精作固定剂。 酒精还可溶解血红蛋白和损害多数其他色素,因此,如果证明组织蛋白的色素时 也不宜以酒精作为固定剂。8 种沉淀即三聚甲醛，是甲醛的一种聚合形式（加热可重新分解成甲醛）。商品福尔马 林用甲醇阻止聚合作用。有时由于溶液不纯或甲醛氧化产生的甲酸成分使溶液呈酸 性，酸性的甲醛溶液使标本嗜染酸性、严重时可导致细胞核的嗜酸性染色。因此，在 备用的甲醛中宜放入小量的碳酸镁或碳酸钠作为中和剂。如果每 100 毫升的福尔马林 固定液中加入 5ml 的吡啶，则可调整 PH 为 7。不过，这些方法不能永久保持其 PH 值； 欲望使其长期保持中性，则需以磷酸缓冲液作溶剂进行配制。其配制方法如下： 10%福尔马林 1000ml 磷酸二氢钠（NaH2PO4） 4g 磷酸氢二钠（Na2HPO4） 6.5g 固定小的组织块数小时即可达到固定要求。如需要快速固定时，可加温到 70～ 80℃，经过 10 分钟即可达到固定要求。在甲醛溶液中短时固定的标本，冲洗时间在 10 分钟至 2 小时即可，但固定时间较长的标本需要较长时间的流水冲洗。一般要冲洗 24 小时，甚至延长 48 小时，否则，由于甲酸的沉淀将会影响染色的结果。 甲醛能保存脂肪和类脂体，对染色体，线粒体，高尔基体，具有良好的固定作用。 经甲醛固定的陈旧组织，尤以多血的肝脾组织内常可出现棕黑色的福尔马林色素 颗粒，这种色素不溶于水，酒精及丙酮等，如欲与含铁血黄素加以区别，可用普鲁士 兰反应进行鉴别。福尔马林色素不含有铁，因此，福尔马林色素呈阴性反应，用中性 或微碱性福尔马林固定的效果能显著增加对铁离子的检出速度且可完全避免福尔马 林色素的形成。此外也可以使用其他试剂以浸洗方法除去福尔马林色素的沉淀，如： （1）苦味酸饱和酒精（90%）溶液浸洗 30 分钟后经 70%酒精再水洗后进行染色。 （2）什端氏（Schriade）法： 70%酒精 200ml 28%氨水 1ml 将石蜡切片在脱蜡以后放于上述液体中 30 分钟，再用流水冲洗，而后染色。若 甲醛产生的色素沉淀仍未被其洗去，则可在 Schriade 氏液中延长时间。此法并不损害 组织。 (3)费罗氏（Verocay）法: 80%酒精 100ml 1%KOH 1ml 将切片在脱蜡至 80%酒精后，浸入上液 10 分钟，再流水冲洗 5 分钟，入 80%酒 精之后水洗染色。 福尔马林固定的标本，经酒精脱水收缩较大，是其缺点。 酒精（C2H5OH） 可单独用作固定液；亦可作混合固定液，因为酒精（乙醇）是一种还原剂，所以 不可与铬酸，重铬酸钾或锇酸等氧化剂相混合使用。在氧量不足时酒精易氧化成乙醛； 氧量充足则能生成酯酸，所以在正常情况下，酒精是偏酸性试剂。 酒精为常用的有机溶剂，能溶解多种有机物，高浓度酒精能凝固白蛋白，球蛋白 和核蛋白，对肝糖有固定作用，核蛋白和肝糖经酒精固定成水溶性状态，因此，经酒 精固定的标本如果固定后用水洗涤，则核着色欠佳，肝糖也将被水解。作为一种脂溶 剂，浓度在 50%以上的酒精可溶解脂肪和类酯体，因此，对脂类的证明，高尔基氏体， 线粒体等染色不宜使用酒精作固定剂。 酒精还可溶解血红蛋白和损害多数其他色素，因此，如果证明组织蛋白的色素时 也不宜以酒精作为固定剂