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浓酒精有较大的收缩力,被它固定的组织收缩显著,表面发硬,因而酒精较难渗 入到组织中去,组织必须用酒精固定时宜先用80%的酒精固定数小时,然后再换95% 酒精,这样可以避免组织过度收缩,因此它的穿透力缓慢且与组织长期接触能使之硬 化,如需要证明尿酸结晶和保存糖类,则须用100%酒精固定。 酒精既有固定作用,又有脱水作用,经酒精固定的标本不需洗涤,可用较高浓度 酒精直接进行脱水,也可暂存于70%酒精中。 醋酸(CH3COOH) 纯醋酸为无色,具有强烈刺激性的酸性液体,温度低于17℃时呈固体状,形成冰 样结晶体。所以,一般称为冰醋酸。 醋酸因使胶原纤维肿胀,故不能单独使用:但在混合固定液中有抗其它试剂使细 胞皱缩的作用。因此,醋酸常同酒精配制成为混合固定液来抵消经过固定所引起组织 的高度收缩和硬化的作用 醋酸可与水,酒精等溶剂相混合。一般使用浓度为0.3~5%,以5%为备用液。用 醋酸固定后的组织不必水洗,即可直接投入50%或70%酒精之中。醋酸的渗透性很强, 般较小的组织块只须1小时即可。 醋酸可使核蛋白沉淀,因此染色质固定很快,是染色质良好的固定液。对蛋白质 具有保存作用,对脂类、糖不产生影响,高浓度醋酸则可溶解脂肪及类脂,并使线粒 体和高尔基体被破坏或变形。所以,一般配制含醋酸的混合液时,其浓度都不超过5%。 苦味酸(C6H(NO2)3OH) 苦味酸是一种具毒性的黄色结晶体,味苦,在空气中干燥时有爆炸性,故需保湿 保存,最好是储存在一层水下。一般情况下,制片室将苦味酸制成饱和溶液作为常备 用液,通常固定的浓度是饱和液,其饱和度为0.9%~1.2%。苦味酸溶于酒精,二甲苯 固定后的组织经酒精脱水即可。苦味酸也是一种良好的组织染色剂,经苦味酸固定剂 固定的组织作三色染色可使颜色对比鲜艳。 苦味酸能沉淀一切蛋白质,并与其结合形成苦味酸盐,遇水时,其中有的部分可 溶与水,因此在一般情况下,组织经苦味酸或含有苦味酸的固定剂固定后,这种水溶 性苦味酸盐在与水接触前需先经酒精处理使其呈不溶性,可以π0%酒精浸洗,在酒精 内加上少量碳酸锂或氨水即可被洗去。或者是不经水洗,直接投入70%酒精脱水。在 脱水过程中,苦味酸可被各级酒精溶解洗去。即使不能全部洗去,亦不妨碍染色,脱 水酒精虽被染黄,但亦不失其脱水效果。 通常苦味酸沉淀红细胞,可移走铁离子,特别是仅少量存在时可使RNA抵抗核 糖核酸酶的消化 重铬酸钾(K2Cr202) 重铬酸钾为一种橘红色有毒性的块状结晶体,溶于水,不溶于酒精,为一种强氧 化剂。所以其水溶液不应与酒精,福尔马林等还原剂相混合使用。在某些情况下,同 福尔马林混合固定标本时,只能在使用前相混合,过久即失去固定作用。经重铬酸钾 固定后的组织应及时进行水洗脱水,否则标本变硬脆化,不易制成切片。如不能当即 制作切片,可将标本保存于福尔马林液内 重铬酸钾对蛋白质的结合作用像福尔马林一样,固定胞浆不易引起沉淀作用。但 在溶液中加入醋酸,PH为375时,会使染色质和细胞浆硬化,使之产生铬酸,才能使 蛋白质呈网状沉淀。重铬酸钾对细胞质,染色质固定良好,但染色质则被溶解。未酸9 浓酒精有较大的收缩力,被它固定的组织收缩显著,表面发硬,因而酒精较难渗 入到组织中去,组织必须用酒精固定时宜先用 80%的酒精固定数小时,然后再换 95% 酒精,这样可以避免组织过度收缩,因此它的穿透力缓慢且与组织长期接触能使之硬 化,如需要证明尿酸结晶和保存糖类,则须用 100%酒精固定。 酒精既有固定作用,又有脱水作用,经酒精固定的标本不需洗涤,可用较高浓度 酒精直接进行脱水,也可暂存于 70%酒精中。 醋酸(CH3COOH) 纯醋酸为无色,具有强烈刺激性的酸性液体,温度低于 17℃时呈固体状,形成冰 样结晶体。所以,一般称为冰醋酸。 醋酸因使胶原纤维肿胀,故不能单独使用;但在混合固定液中有抗其它试剂使细 胞皱缩的作用。因此,醋酸常同酒精配制成为混合固定液来抵消经过固定所引起组织 的高度收缩和硬化的作用。 醋酸可与水,酒精等溶剂相混合。一般使用浓度为 0.3~5%,以 5%为备用液。用 醋酸固定后的组织不必水洗,即可直接投入 50%或 70%酒精之中。醋酸的渗透性很强, 一般较小的组织块只须 1 小时即可。 醋酸可使核蛋白沉淀,因此染色质固定很快,是染色质良好的固定液。对蛋白质 具有保存作用,对脂类、糖不产生影响,高浓度醋酸则可溶解脂肪及类脂,并使线粒 体和高尔基体被破坏或变形。所以,一般配制含醋酸的混合液时,其浓度都不超过 5%。 苦味酸(C6H2(NO2)3OH) 苦味酸是一种具毒性的黄色结晶体,味苦,在空气中干燥时有爆炸性,故需保湿 保存,最好是储存在一层水下。一般情况下,制片室将苦味酸制成饱和溶液作为常备 用液,通常固定的浓度是饱和液,其饱和度为 0.9%~1.2%。苦味酸溶于酒精,二甲苯, 固定后的组织经酒精脱水即可。苦味酸也是一种良好的组织染色剂,经苦味酸固定剂 固定的组织作三色染色可使颜色对比鲜艳。 苦味酸能沉淀一切蛋白质,并与其结合形成苦味酸盐,遇水时,其中有的部分可 溶与水,因此在一般情况下,组织经苦味酸或含有苦味酸的固定剂固定后,这种水溶 性苦味酸盐在与水接触前需先经酒精处理使其呈不溶性,可以 70%酒精浸洗,在酒精 内加上少量碳酸锂或氨水即可被洗去。或者是不经水洗,直接投入 70%酒精脱水。在 脱水过程中,苦味酸可被各级酒精溶解洗去。即使不能全部洗去,亦不妨碍染色,脱 水酒精虽被染黄,但亦不失其脱水效果。 通常苦味酸沉淀红细胞,可移走铁离子,特别是仅少量存在时可使 RNA 抵抗核 糖核酸酶的消化。 重铬酸钾(K2Cr207) 重铬酸钾为一种橘红色有毒性的块状结晶体,溶于水,不溶于酒精,为一种强氧 化剂。所以其水溶液不应与酒精,福尔马林等还原剂相混合使用。在某些情况下,同 福尔马林混合固定标本时,只能在使用前相混合,过久即失去固定作用。经重铬酸钾 固定后的组织应及时进行水洗脱水,否则标本变硬脆化,不易制成切片。如不能当即 制作切片,可将标本保存于福尔马林液内。 重铬酸钾对蛋白质的结合作用像福尔马林一样,固定胞浆不易引起沉淀作用。但 在溶液中加入醋酸,PH为3.75时,会使染色质和细胞浆硬化,使之产生铬酸,才能使 蛋白质呈网状沉淀。重铬酸钾对细胞质,染色质固定良好,但染色质则被溶解。未酸
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