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化的重铬酸钾虽不能沉淀蛋白质,但可使蛋白质变为不溶性,还可以保护磷脂类,亦 能固定类脂物,使其不溶解于脂溶剂。因此,可以固定高尔基氏体和线粒体 重铬酸钾不是糖的固定液,用重铬酸钾(或铬酸)固定的组织几乎完全不会发生 收缩,但经酒精脱水时,则收缩明显。所以在脱水之前,组织需用流水冲洗16-12小 时。如把含铬组织直接转移到酒精内,会形成一种非溶性低氧化物而不易除去 重铬酸钾有溶解染色质的缺点,一般备用液为5%水溶液,固定液使用浓度为1%-3% 水溶液 铬酸(Cr03) 为暗红色或带暗紫色的块状结晶,具有强酸性及腐蚀性,剧毒,易潮解,为强氧 化剂,应置于暗处。它是Oth氏液或 Zen rer氏液等复合固定剂中的一种成分,不应同 酒精、福尔马林等还原剂混合使用。铬酸与乙醇,乙醚少许接触即可引起爆炸。 铬酸可沉淀所有的蛋白质,使不溶于水,并可保存糖类。铬酸水解DNA系将其戊 糖转变为一种醛;亦可将糖类转变为醛。因此DNA和糖类不需经过常规PAS或 Feulgen 反应的预先处理即与Sch试剂呈阳性染色 铬酸的渗透力较低,对标本收缩轻微,经铬酸固定剂固定的组织像用重铬酸钾固 定一样需彻底水洗,将组织中铬酸全部洗去,否则在脱水过程中,铬酸与酒精作用生 成氧化铬的沉淀,使组织脆化,且不易于组织的着色。铬酸适合固定的浓度为05% 四氧化锇(OsO4) 为微黄色结晶,通常密装于安瓿内出售,为强氧化剂,一般认为它使未饱和键氧 化。对饱和脂肪不起反应,未饱和脂类可还原0s04,易氧化为黑色氢氧化物,溶液呈 中性,挥发性强,在操作四氧化锇时应小心,因其气体有刺激性,会引起结膜炎。遇 热和光时易还原,故应贮于冷暗处。平时溶液密闭有色瓶中,并置于冰箱内。 四氧化锇是脂肪和类脂质的固定液,用以显示脂类(例如髓脂类)。能使单个细 胞或小组织的微细构造得以极好地保存,因此几乎是用于电子显微术最佳固定剂。组 织经固定后,脂肪,类脂呈黑色,微溶于二甲苯及酒精,脱水后最好以苯作透明剂。 四氧化锇的渗透力弱。组织块如过2-3厘米厚度则穿透不良和不均。所有含四氧 化锇固定剂的固定作用皆很不均匀:固定不良的组织切片表现周围有一圈过度固定的 暗色区带:中心为固定不足致使细胞微细结构不清的区域。有些成分变暗是由于无色 的0s04转变为黑色水合物0s04·5H0形式 四氧化锇常与铬酸,醋酸,重铬酸钾等混合使用,固定后的组织需经流水冲洗, 否则在脱水酒精中易被还原产生沉淀,不利于核着色,在每10毫升溶液中内加入1滴 饱和氯化汞水溶液有助于制止还原作用。 氯化汞(又名升汞或二氯化汞HgCL2) 氯化汞为白色粉末或针状结晶,后者为化学纯品,易升华,能溶于水和酒精 般固定用其饱和溶液 氯化汞是一种能迅速透入并使组织硬化的蛋白沉淀剂。通常像别的金属离子那 样,它与蛋白质的酸基以及核蛋白的磷酸基相结合,亦特异地与氢硫基起反应。因而 经Hg固定后的蛋白质不溶于水,大多数蛋白反应可被利用。可惜,它的透入速度于最 初几毫米后就急骤降低,因此组织块厚度如超过5毫米常使外围过度固定致坚硬而中10 化的重铬酸钾虽不能沉淀蛋白质,但可使蛋白质变为不溶性,还可以保护磷脂类,亦 能固定类脂物,使其不溶解于脂溶剂。因此,可以固定高尔基氏体和线粒体。 重铬酸钾不是糖的固定液,用重铬酸钾(或铬酸)固定的组织几乎完全不会发生 收缩,但经酒精脱水时,则收缩明显。所以在脱水之前,组织需用流水冲洗16-12小 时。如把含铬组织直接转移到酒精内,会形成一种非溶性低氧化物而不易除去。 重铬酸钾有溶解染色质的缺点,一般备用液为5%水溶液,固定液使用浓度为1%-3% 水溶液。 铬酸(CrO3) 为暗红色或带暗紫色的块状结晶,具有强酸性及腐蚀性,剧毒,易潮解,为强氧 化剂,应置于暗处。它是Orth氏液或ZenRer氏液等复合固定剂中的一种成分,不应同 酒精、福尔马林等还原剂混合使用。铬酸与乙醇,乙醚少许接触即可引起爆炸。 铬酸可沉淀所有的蛋白质,使不溶于水,并可保存糖类。铬酸水解DNA系将其戊 糖转变为一种醛;亦可将糖类转变为醛。因此DNA和糖类不需经过常规PAS或Feulgen 反应的预先处理即与Schiff试剂呈阳性染色。 铬酸的渗透力较低,对标本收缩轻微,经铬酸固定剂固定的组织像用重铬酸钾固 定一样需彻底水洗,将组织中铬酸全部洗去,否则在脱水过程中,铬酸与酒精作用生 成氧化铬的沉淀,使组织脆化,且不易于组织的着色。铬酸适合固定的浓度为0.5%~ 1%。 四氧化锇(OsO4) 为微黄色结晶,通常密装于安瓿内出售,为强氧化剂,一般认为它使未饱和键氧 化。对饱和脂肪不起反应,未饱和脂类可还原OsO4,易氧化为黑色氢氧化物,溶液呈 中性,挥发性强,在操作四氧化锇时应小心,因其气体有刺激性,会引起结膜炎。遇 热和光时易还原,故应贮于冷暗处。平时溶液密闭有色瓶中,并置于冰箱内。 四氧化锇是脂肪和类脂质的固定液,用以显示脂类(例如髓脂类)。能使单个细 胞或小组织的微细构造得以极好地保存,因此几乎是用于电子显微术最佳固定剂。组 织经固定后,脂肪,类脂呈黑色,微溶于二甲苯及酒精,脱水后最好以苯作透明剂。 四氧化锇的渗透力弱。组织块如过2-3厘米厚度则穿透不良和不均。所有含四氧 化锇固定剂的固定作用皆很不均匀;固定不良的组织切片表现周围有一圈过度固定的 暗色区带;中心为固定不足致使细胞微细结构不清的区域。有些成分变暗是由于无色 的OsO4转变为黑色水合物OsO4·5H2O形式。 四氧化锇常与铬酸,醋酸,重铬酸钾等混合使用,固定后的组织需经流水冲洗, 否则在脱水酒精中易被还原产生沉淀,不利于核着色,在每10毫升溶液中内加入1滴 饱和氯化汞水溶液有助于制止还原作用。 氯化汞(又名升汞或二氯化汞HgCL2) 氯化汞为白色粉末或针状结晶,后者为化学纯品,易升华,能溶于水和酒精。一 般固定用其饱和溶液。 氯化汞是一种能迅速透入并使组织硬化的蛋白沉淀剂。通常像别的金属离子那 样,它与蛋白质的酸基以及核蛋白的磷酸基相结合,亦特异地与氢硫基起反应。因而 经Hg固定后的蛋白质不溶于水,大多数蛋白反应可被利用。可惜,它的透入速度于最 初几毫米后就急骤降低,因此组织块厚度如超过5毫米常使外围过度固定致坚硬而中
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