实验三果树叶片中活性铁含量的测定—邻啡罗啉法 铁是植物所必须的微量元素之一。在叶绿素形成时，铁起着决定性的触媒剂 作用，因此，植物缺铁时就显出黄叶病，在果树发生缺铁症状时，可以结合对果 树的叶片活性铁含量测定加以判断 一、方法原理 以盐酸羟胺为还原剂，将三价铁还原为二价铁。在PH2一9的范围内，用邻 啡罗啉络合二价铁，生成橙红色的络合物F(C1HsN2P+。其反应如下： Fe++3C12HsN2->[Fe(Cn2HsNz)P (邻啡罗啉) (橙红色) 在一定浓度范围内，红色深浅与亚铁离子含量成正比。在显色溶液中铁含量 在0.16mg·1时符合Beer定律，波长530nm 二、测定步骤 1、测定液的制备 ①测样准备：取果树枝条稍上叶片10一100个（结果枝或不结果枝均可）， 先用自来水冲洗，除去叶面污染物，再用蒸馏水冲洗2一3次，擦干，将洗净的 叶片切成1毫米左右长的小段。 ②精确称取0.5克混合匀的测样，放入试管中。 ③加入2毫升6mol·1,摇匀，静置30分钟 ④加5ml蒸馏水稀释，并过滤于50毫升容量瓶中。 2、在测液容量瓶中，加入1毫升10%盐酸羟胺，还原铁，约2一3分钟。 3、加3滴2.4一一二硝基酚指标剂，加20毫升10%醋酸的溶液，调节待测 溶液的pH为3.5左右。 再加10毫升0.1%邻啡罗林水溶液，进行显色，加蒸馏水至刻度，摇匀，半 小时后比色。 4、在722型分光光度计上，选用530nm波长测定显色液的吸光度。 5、根据测得吸光度，在铁的标准曲线上查得测定液铁的浓度。 三、结果计算实验三 果树叶片中活性铁含量的测定——邻啡罗啉法 铁是植物所必须的微量元素之一。在叶绿素形成时，铁起着决定性的触媒剂 作用，因此，植物缺铁时就显出黄叶病，在果树发生缺铁症状时，可以结合对果 树的叶片活性铁含量测定加以判断。 一、方法原理 以盐酸羟胺为还原剂，将三价铁还原为二价铁。在 PH2—9 的范围内，用邻 啡罗啉络合二价铁，生成橙红色的络合物[Fe(C12H8N2)3] 2+。其反应如下： Fe2++3C12H8N2 ⎯⎯PH2⎯−9→ [Fe(C12H3N2)3] 2+ (邻啡罗啉) （橙红色） 在一定浓度范围内，红色深浅与亚铁离子含量成正比。在显色溶液中铁含量 在 0.1~6mg· −1 l 时符合 Beer 定律，波长 530nm。 二、测定步骤 1、测定液的制备： ①测样准备：取果树枝条稍上叶片 10—100 个（结果枝或不结果枝均可）， 先用自来水冲洗，除去叶面污染物，再用蒸馏水冲洗 2—3 次，擦干，将洗净的 叶片切成 1 毫米左右长的小段。 ②精确称取 0.5 克混合匀的测样，放入试管中。 ③加入 2 毫升 6 mol· −1 l ，摇匀，静置 30 分钟。 ④加 5ml 蒸馏水稀释，并过滤于 50 毫升容量瓶中。 2、在测液容量瓶中，加入 1 毫升 10%盐酸羟胺，还原铁，约 2—3 分钟。 3、加 3 滴 2.4——二硝基酚指标剂，加 20 毫升 10%醋酸的溶液，调节待测 溶液的 pH 为 3.5 左右。 再加 10 毫升 0.1%邻啡罗林水溶液，进行显色，加蒸馏水至刻度，摇匀，半 小时后比色。 4、在 722 型分光光度计上，选 用 530nm 波长测定显色液的吸光度。 5、根据测得吸光度，在铁的标准曲线上查得测定液铁的浓度。 三、结果计算