（1）抗体包被：羊抗人IgG 酶联板每孔加100 µL，4 ℃ 过夜；甩净。 （2）封闭：2% 小牛血清，每孔加100 µL，37 ℃ 封闭30 min；封 闭后洗三次（前两次用自来水冲、甩； 第三次用洗液， 并静 置 3 min，甩） （3）加待测抗原：正常人血清稀释成,1:5,1:10,1:20,1:40,1:80 , 生理盐水作为对照，每孔加 100 µL，注意从高稀释度到低稀释 度加样，37 ℃ 孵育1h ；洗三次 （4）加酶标抗体：HRP-IgG（PBS-Tween，5%BS；1：800稀释）， 每孔加 100 µL，37 ℃，30 min；洗三次 四 操作 步骤（1）抗体包被：羊抗人IgG 酶联板每孔加100 µL，4 ℃ 过夜；甩净。 （2）封闭：2% 小牛血清，每孔加100 µL，37 ℃ 封闭30 min；封 闭后洗三次（前两次用自来水冲、甩； 第三次用洗液， 并静 置 3 min，甩） （3）加待测抗原：正常人血清稀释成,1:5,1:10,1:20,1:40,1:80 , 生理盐水作为对照，每孔加 100 µL，注意从高稀释度到低稀释 度加样，37 ℃ 孵育1h ；洗三次 （4）加酶标抗体：HRP-IgG（PBS-Tween，5%BS；1：800稀释）， 每孔加 100 µL，37 ℃，30 min；洗三次 四 操作 步骤