第一章概论 三、抗体技术的发展 抗体技术领域的进展大致可分为三个阶段： ①以1890年Behring和Kitasato发现白喉抗毒素为代表，其特点是用抗原免疫动物来 获得多克降抗体。 ②以1975年Kohler和Milstein创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表。 ③以1994年Winter采用基因工程方法制备抗体为代表。这是抗体研究领域出现的又 一次技术革命，在此基础上发展成为抗体工程。 (日多克抗体 1888年，Emile Roux和Yersin在研究白喉发病机制时，发现白喉菌能产生外毒素。在 此基础上，1890年，德国人Behring和日本人北里(Kitasato)将白喉外青素注射给动物，发现 在该动物血清中存在一种能中和白喉外毒素的物质，他们称之为抗毒素。将具有抗毒素的免 疫血清注入正常动物体内，可使后者同样对白喉毒素有抵抗力。他们以同样的方法用这种免 疫血清成功地治愈了一例患白喉病的女孩，这是第一次用人工被动免疫的方法治疗疾病。由 于开创了人工被动免疫治疗疾病的方法，两位学者在1901年荣获诺贝尔奖。 白单克隆抗体 1975年，英国剑桥的科学家Kohler和Milstein发明了杂交瘤技术。由于他们的这一卓 越贡献，与丹麦人Jee共获1984年诺贝尔生理学或医学奖。他们将小鼠骨随细胞和经 绵羊红细胞(sheep red blood cell,SRBC)免疫的小鼠脾细胞在体外进行融合，结果发现部分 形成的杂交细胞既能继续在体外培养条件下生长繁殖，又能分泌抗SBC抗体，称这种杂交 细胞系为杂交瘤(hybridoma)。这种杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞能大量无限生长繁殖的特 性，又具有抗体形成细胞合成和分泌抗体的能力。它们是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆 所产生的均一性抗体，故称之为单克隆抗体。应用杂交瘤技术可获得几乎所有抗原的单克隆 抗体，只要这种抗原能引起小鼠的抗体应答。与多克隆抗体相比，这种用杂交瘤技术制备的 单克隆抗体可视为第二代抗体。 单克隆抗体纯度高、特异性强、可以提高各种血清学方法检测抗原的敏感性及特异性， 其应用大大促进了对各种传染病和恶性肿瘤诊断的准确性。单克隆抗体亦可与放射性核素、 各种毒素（如白喉外毒素或篦麻毒素）或药物通过化学耦联或基因重组制备成导向药物用于 肿瘤的治疗，是一种新型免疫治疗方法，有可能提高对肿瘤的疗效。此外，单克降抗体亦可 用于对各种免疫细胞及其他组织细胞表面分子的检测，这对免疫细胞的分离、鉴定、分类及 研究各种膜表面分子的结构与功能都具有重要意义。 但美中不足的是，目前绝大多数单克隆抗体是鼠源的，临床重复给药时体内产生抗鼠抗 体，使临床疗效减弱或消失。因此，临床应用理想的单克隆抗体应是人源的，但人~人杂交 瘤技术目前尚未突破，即使研制成功，也还存在人人杂交瘤体外传代不稳定、抗体亲和力 低及产量不高等问题。目前较好的解决办法是研制基因工程抗体以代替鼠源单克隆抗体用于 临床。 -3- 第一章 概论 - 3 - 三、抗体技术的发展 抗体技术领域的进展大致可分为三个阶段： ① 以 1890 年 Behring 和 Kitasato 发现白喉抗毒素为代表，其特点是用抗原免疫动物来 获得多克隆抗体。 ② 以 1975 年 Kohler 和 Milstein 创建杂交瘤技术制备单克隆抗体为代表。 ③ 以 1994 年 Winter 采用基因工程方法制备抗体为代表。这是抗体研究领域出现的又 一次技术革命，在此基础上发展成为抗体工程。 ㈠ 多克隆抗体 1888 年，Emile Roux 和 Yersin 在研究白喉发病机制时，发现白喉菌能产生外毒素。在 此基础上，1890 年，德国人 Behring 和日本人北里(Kitasato)将白喉外毒素注射给动物，发现 在该动物血清中存在一种能中和白喉外毒素的物质，他们称之为抗毒素。将具有抗毒素的免 疫血清注入正常动物体内，可使后者同样对白喉毒素有抵抗力。他们以同样的方法用这种免 疫血清成功地治愈了一例患白喉病的女孩，这是第一次用人工被动免疫的方法治疗疾病。由 于开创了人工被动免疫治疗疾病的方法，两位学者在 1901 年荣获诺贝尔奖。 ㈡ 单克隆抗体 1975 年，英国剑桥的科学家 Kohler 和 Milstein 发明了杂交瘤技术。由于他们的这一卓 越贡献，与丹麦人 Jerne 共获 1984 年诺贝尔生理学或医学奖。他们将小鼠骨髓瘤细胞和经 绵羊红细胞(sheep red blood cell，SRBC)免疫的小鼠脾细胞在体外进行融合，结果发现部分 形成的杂交细胞既能继续在体外培养条件下生长繁殖，又能分泌抗 SRBC 抗体，称这种杂交 细胞系为杂交瘤(hybridoma)。这种杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞能大量无限生长繁殖的特 性，又具有抗体形成细胞合成和分泌抗体的能力。它们是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆 所产生的均一性抗体，故称之为单克隆抗体。应用杂交瘤技术可获得几乎所有抗原的单克隆 抗体，只要这种抗原能引起小鼠的抗体应答。与多克隆抗体相比，这种用杂交瘤技术制备的 单克隆抗体可视为第二代抗体。 单克隆抗体纯度高、特异性强、可以提高各种血清学方法检测抗原的敏感性及特异性， 其应用大大促进了对各种传染病和恶性肿瘤诊断的准确性。单克隆抗体亦可与放射性核素、 各种毒素(如白喉外毒素或蓖麻毒素)或药物通过化学耦联或基因重组制备成导向药物用于 肿瘤的治疗，是一种新型免疫治疗方法，有可能提高对肿瘤的疗效。此外，单克隆抗体亦可 用于对各种免疫细胞及其他组织细胞表面分子的检测，这对免疫细胞的分离、鉴定、分类及 研究各种膜表面分子的结构与功能都具有重要意义。 但美中不足的是，目前绝大多数单克隆抗体是鼠源的，临床重复给药时体内产生抗鼠抗 体，使临床疗效减弱或消失。因此，临床应用理想的单克隆抗体应是人源的，但人-人杂交 瘤技术目前尚未突破，即使研制成功，也还存在人-人杂交瘤体外传代不稳定、抗体亲和力 低及产量不高等问题。目前较好的解决办法是研制基因工程抗体以代替鼠源单克隆抗体用于 临床