步骤后的酶的比活力与该步骤前的比活力之比。 问答题 1、固定化细胞发酵有哪些优点? (1)细胞流失少,使用寿命长,提高设备利用率 (2)细胞密度大,产量大 (3)由于载体的保护,细胞的耐受性增强 (4)便于条件控制,简化操作,易于自动化生产 (5)催化产物少了细胞的干扰,易于分离提纯 (6)由于使用周期延长,使成本降低。 2、举出四例,说明酶在医学上有广阔的用途。 (1)医药用酶:a消化用酶:α、β一淀粉酶、胰酶、胰蛋白酶 消炎用酶:木瓜蛋白酶、菠萝酶 C.溶纤维酶:尿酸酶、链激酶、溶栓酶 d.肿瘤用酶:L一天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶 (2)诊断用酶:a.尿酸酶:用于检测血液和尿液中的尿酸含量 b.甘油激酶:由于检测血液中甘油三酯的含量 (3)检测用酶:a.脱羧酶:由于检测L一赖氨酸和L一谷氨酸 b.虫荧光素酶:用于检测ATP 3、用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺过程及主要工艺条件 应用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺流程及主要工艺条件如下: 淀粉调浆(淀粉与水) 配料罐· 除渣剂 喷射液化器 90C液化维持罐30-40min 气液混合灭酶(加入蒸汽) 灭酶维持罐 气液分离罐 板式冷却器 糖化罐 气液混合灭酶器 中和脱色罐—板框过滤机—滤清糖液贮罐 采用凝胶层析除杂 进一步精制,干燥的固体麦芽糊精 4、如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂?试用所学过的知识加以论述 要检测酶的制剂是否达到纯的制剂(即不含杂质及杂质酶),可以有以下几种方法: (1)层析法:包括纸层析、凝胶层析、柱层析及亲和层析 (2)电泳法:包括SDS凝胶电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (3)超离心法:不同的酶分子大小不同,在重力场中具有不同的沉降系数,从而可以通 过超离心方法分离目的酶与杂质酶。 (4)免疫反应法:由于酶分子可作为一种抗原物质,而抗原与抗体之间具有专一的亲和 力,故可选用目的酶的抗体与酶制剂进行免疫扩散或免疫电泳,从而判断酶的制剂 是否纯净。 (5)氨基酸序列分析法:采用特定的化学物质从酶的N末端将氨基酸残基逐个水解下来, 最终可获知该酶的氨基酸序列,从而也可以判断出酶制剂是否纯净。 5、今欲生产糖化酶结晶产品,试拟出合理的工艺步骤,并说明下游工程的主要工艺条件 生产糖化酶的结晶产品,可采用盐析结晶法。得到糖化酶粗酶液后,须进行分离纯化,使其 达到一定的浓度和纯度(>50%),向浓酶液中缓慢加入饱和中性盐溶液((NH4)2SO4), 至岀现稍浑浊,于低温下(0-4°C)静置,待溶液中有晶体析出,可向溶液中补充少量饱和 盐溶液。(操作过程中保证PH≈4.5),也可采用有机溶剂法结晶。向浓酶液中缓慢加入有机 溶剂,混合均匀,于低温下静置一段时间,离心去除沉淀物,取上清液静置于低温下,可析 出晶体。 发酵生产糖化酶工艺流程:步骤后的酶的比活力与该步骤前的比活力之比。 三、 问答题 1、 固定化细胞发酵有哪些优点？ （1） 细胞流失少，使用寿命长，提高设备利用率 （2） 细胞密度大，产量大 （3） 由于载体的保护，细胞的耐受性增强 （4） 便于条件控制，简化操作，易于自动化生产 （5） 催化产物少了细胞的干扰，易于分离提纯 （6） 由于使用周期延长，使成本降低。 2、 举出四例，说明酶在医学上有广阔的用途。 （1） 医药用酶：a.消化用酶：α、β－淀粉酶、胰酶、胰蛋白酶 b.消炎用酶：木瓜蛋白酶、菠萝酶 c.溶纤维酶：尿酸酶、链激酶、溶栓酶 d.肿瘤用酶：L－天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶 （2） 诊断用酶：a.尿酸酶：用于检测血液和尿液中的尿酸含量 b.甘油激酶：由于检测血液中甘油三酯的含量 （3） 检测用酶：a.脱羧酶：由于检测 L－赖氨酸和 L－谷氨酸 b.虫荧光素酶：用于检测 ATP 3、 用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺过程及主要工艺条件。 应用双酶法生产固体麦芽糊精的工艺流程及主要工艺条件如下： 淀粉调浆（淀粉与水） 配料罐 除渣剂 喷射液化器 90oC 液化维持罐 30－40min 气液混合灭酶（加入蒸汽） 灭酶维持罐 气液分离罐 板式冷却器 糖化罐 气液混合灭酶器 中和脱色罐 板框过滤机 滤清糖液贮罐 采用凝胶层析除杂 进一步精制，干燥的固体麦芽糊精 4、 如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂？试用所学过的知识加以论述。 要检测酶的制剂是否达到纯的制剂（即不含杂质及杂质酶），可以有以下几种方法： （1） 层析法：包括纸层析、凝胶层析、柱层析及亲和层析 （2） 电泳法：包括 SDS 凝胶电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法 （3） 超离心法：不同的酶分子大小不同，在重力场中具有不同的沉降系数，从而可以通 过超离心方法分离目的酶与杂质酶。 （4） 免疫反应法：由于酶分子可作为一种抗原物质，而抗原与抗体之间具有专一的亲和 力，故可选用目的酶的抗体与酶制剂进行免疫扩散或免疫电泳，从而判断酶的制剂 是否纯净。 （5） 氨基酸序列分析法：采用特定的化学物质从酶的 N 末端将氨基酸残基逐个水解下来， 最终可获知该酶的氨基酸序列，从而也可以判断出酶制剂是否纯净。 5、 今欲生产糖化酶结晶产品，试拟出合理的工艺步骤，并说明下游工程的主要工艺条件。 生产糖化酶的结晶产品，可采用盐析结晶法。得到糖化酶粗酶液后，须进行分离纯化，使其 达到一定的浓度和纯度（﹥50％），向浓酶液中缓慢加入饱和中性盐溶液（（NH4）2SO4）， 至出现稍浑浊，于低温下（0－4 oC）静置，待溶液中有晶体析出，可向溶液中补充少量饱和 盐溶液。（操作过程中保证 PH≈4.5），也可采用有机溶剂法结晶。向浓酶液中缓慢加入有机 溶剂，混合均匀，于低温下静置一段时间，离心去除沉淀物，取上清液静置于低温下，可析 出晶体。 发酵生产糖化酶工艺流程：