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剂。如酶作用的底物、辅酶、某些抗氧化剂等。 3沉淀分离 ◆沉淀分离是通过改变某些条件或添加某种物质,使酶的溶解度降低,而从溶液中沉淀析出, 与其它溶质分离的技术过程。 ◆沉淀分离是酶的分离纯化过程中经常采用的方法。 ◆沉淀分离的方法主要有盐析沉淀法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法、复合沉淀法、选择 性变性沉淀法等。 表4-3沉淀分离方法 沉淀分离方法 分离原理 盐析沉淀法 利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特性, 通过在酶液中添加一定浓度的中性盐,使酶或杂质从溶液中 析出沉淀,从而使酶与杂质分离 等电点沉淀法利用两性电解质在等电点时溶解度最低,以及不同的两性电 解质有不同的等电点这一特性,通过调节溶液的pH值,使 酶或杂质沉淀析出,从而使酶与杂质分离 有机溶剂沉淀法利用酶与其它杂质在有机溶剂中的溶解度不同,通过添加一 定量的某种有机溶剂,使酶或杂质沉淀析出,从而使酶与杂 质分离 复合沉淀法 在酶液中加入某些物质,使它与酶形成复合物而沉淀下来 而使酶与杂质分离5 剂。如酶作用的底物、辅酶、某些抗氧化剂等。 3.沉淀分离 ◆沉淀分离是通过改变某些条件或添加某种物质,使酶的溶解度降低,而从溶液中沉淀析出, 与其它溶质分离的技术过程。 ◆沉淀分离是酶的分离纯化过程中经常采用的方法。 ◆沉淀分离的方法主要有盐析沉淀法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法、复合沉淀法、选择 性变性沉淀法等。 表 4-3 沉淀分离方法 沉淀分离方法 分离原理 盐析沉淀法 利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特性, 通过在酶液中添加一定浓度的中性盐,使酶或杂质从溶液中 析出沉淀,从而使酶与杂质分离 等电点沉淀法 利用两性电解质在等电点时溶解度最低,以及不同的两性电 解质有不同的等电点这一特性,通过调节溶液的 pH 值,使 酶或杂质沉淀析出,从而使酶与杂质分离 有机溶剂沉淀法 利用酶与其它杂质在有机溶剂中的溶解度不同,通过添加一 定量的某种有机溶剂,使酶或杂质沉淀析出,从而使酶与杂 质分离 复合沉淀法 在酶液中加入某些物质,使它与酶形成复合物而沉淀下来, 从而使酶与杂质分离
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