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大的酶 酸溶液提取PH2~6的水溶液 用于提取在稀酸溶液中溶解度大,且稳 定性较好的酶 碱溶液提取PH8~12的水溶液 用于提取在稀碱溶液中溶解度大且稳 定性较好的酶 有机溶剂提取可与水混溶的有机溶剂用于提取那些与脂质结合牢固或含有 较多非极性基团的酶 22影响酶提取的主要因素 ◆主要影响因素是酶在所使用的溶剂中的溶解度以及酶向溶剂相中扩散的速度。 ◆此外,还受到温度、pH值、提取液体积等提取条件的影响。 (1)温度:提取时的温度对酶的提取效果有明显影响。一般说来,适当提高温度,可以提高 酶的溶解度,也可以增大酶分孑的扩散速度 (2)pH值:溶液的pH值对酶的溶解度和稳定性有显著影响。为了提高酶的溶解度,提取时 pH值应该避开酶的等电点。 (3)提取液的体积:增加提取液的用量,可以提高酶的提取率。但是过量的提取液,会使酶 的浓度降低,对进一步的分离纯化不利。所以提取液的总量一般为原料体积的3~5倍,最 好分几次提取 此外,在酶的提取过程中,含酶原料的颗粒体积越小,则扩散面积越大,有利于提高扩 散速度;适当的搅拌可以使提取液中的酶分子迅速离开原料颗粒表面,从而增大两相界面的 浓度差,有利于提高扩散速率;适当延长提取时间,可以使更多的酶溶解出来,直至达到平 在提取过程中,为了提高酶的稳定性,免致在引起酶的变性失活,可适当加入某些保护4 大的酶 酸溶液提取 PH2~6 的水溶液 用于提取在稀酸溶液中溶解度大,且稳 定性较好的酶 碱溶液提取 PH8~12 的水溶液 用于提取在稀碱溶液中溶解度大且稳 定性较好的酶 有机溶剂提取 可与水混溶的有机溶剂 用于提取那些与脂质结合牢固或含有 较多非极性基团的酶 2.2 影响酶提取的主要因素 ◆主要影响因素是酶在所使用的溶剂中的溶解度以及酶向溶剂相中扩散的速度。 ◆此外,还受到温度、pH 值、提取液体积等提取条件的影响。 (1)温度:提取时的温度对酶的提取效果有明显影响。一般说来,适当提高温度,可以提高 酶的溶解度,也可以增大酶分子的扩散速度。 (2)pH 值:溶液的 pH 值对酶的溶解度和稳定性有显著影响。为了提高酶的溶解度,提取时 pH 值应该避开酶的等电点。 (3)提取液的体积:增加提取液的用量,可以提高酶的提取率。但是过量的提取液,会使酶 的浓度降低,对进一步的分离纯化不利。所以提取液的总量一般为原料体积的 3~5 倍,最 好分几次提取。 此外,在酶的提取过程中,含酶原料的颗粒体积越小,则扩散面积越大,有利于提高扩 散速度;适当的搅拌可以使提取液中的酶分子迅速离开原料颗粒表面,从而增大两相界面的 浓度差,有利于提高扩散速率;适当延长提取时间,可以使更多的酶溶解出来,直至达到平 衡。 在提取过程中,为了提高酶的稳定性,免致在引起酶的变性失活,可适当加入某些保护
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