胞)直接发育成胚状体，然后长成单倍体植株；或者是通过组织诱导分化出芽和根，最终长 成植株。 琼脂培养 固体培养 固定化培养 细胞培养 摇瓶悬浮培养 液体培养 分批培养 大规模培养 半连续培养 恒化培养 连续培养 恒浊培养 图 14-7 植物细胞的培养系统 (2)原生质体培养 植物的体细胞(二倍体细胞)经过纤维素酶处理后可去掉细胞壁，获 得的除去细胞壁的细胞称为原生质体。该原生质体在良好的无菌培养基中可以生长、分裂， 最终可以长成植株。实际过程中，也可以用不同植物的原生质体进行融合与体细胞杂交，由 此可获得细胞杂交的植株。 (3)固体培养 固体培养是在微生物培养的基础上发展起来的植物细胞培养方法。固体 培养基的凝固剂除去特殊研究外，几乎都使用琼脂，浓度一般为 2％～3％，细胞在培养基 表面生长。原生质体固体培养则需混入培养基内进行嵌合培养，或者使原生质体在固体-液 体之间进行双相培养。 (4)液体培养液体培养 也是在微生物培养的基础上发展起来的植物细胞培养方法。液 体培养可分为静止培养和振荡培养等两类。静止培养不需要任何设备，适合于某些原生质体 的培养。振荡培养需要摇床使培养物和培养基保持充分混合以利于气体交换。 (5)悬浮培养植物细胞的悬浮培养 是一种使组织培养物分离或单细胞并不断扩增的方 法。在进行细胞培养时，需要提供容易破裂的愈伤组织进行液体振荡培养，愈伤组织经过悬 浮培养可以产生比较纯一的单细胞。用于悬浮培养的愈伤组织应该是易碎的，这样在液体培 养条件下能获得分散的单细胞，而紧密不易碎的愈伤组织就不能达到上述目的。 (6)固定化培养 固定化培养是在微生物和酶的固定化培养基础上发展起来的植物细 胞培养方法。该法与固定化酶或微生物细胞类似，应用最广泛的，能够保持细胞活性的固定 化方法是将细胞包埋于海藻酸盐或卡拉胶中。 四、植物细胞的大规模培养技术 目前用于植物细胞大规模培养的技术主要有植物细胞的大规模悬浮培养和植物细胞或 原生质体的固定化培养。 (一)植物细胞的大规模悬浮培养 悬浮培养通常采用水平振荡摇床，可变速率为 30～150r／min，振幅 2～4cm，温度 24～ 30℃。适合于愈伤组织培养的培养基不一定适合悬浮细胞培养。悬浮培养的关键就是要寻找 适合于悬浮培养物快速生长，有利于细胞分散和保持分化再生能力的培养基。 1、悬浮培养中的植物细胞的特性 由于植物细胞有其自身的特性，尽管人们已经在各种微生物反应器中成功进行了植物细 胞的培养，但是植物细胞培养过程的操作条件与微生物培养是不同的。与微生物细胞相比， 植物细胞要大得多，其平均直径要比微生物细胞大 30～100 倍。同时植物细胞很少是以单一胞)直接发育成胚状体，然后长成单倍体植株；或者是通过组织诱导分化出芽和根，最终长 成植株。 琼脂培养 固体培养 固定化培养 细胞培养 摇瓶悬浮培养 液体培养 分批培养 大规模培养 半连续培养 恒化培养 连续培养 恒浊培养 图 14-7 植物细胞的培养系统 (2)原生质体培养 植物的体细胞(二倍体细胞)经过纤维素酶处理后可去掉细胞壁，获 得的除去细胞壁的细胞称为原生质体。该原生质体在良好的无菌培养基中可以生长、分裂， 最终可以长成植株。实际过程中，也可以用不同植物的原生质体进行融合与体细胞杂交，由 此可获得细胞杂交的植株。 (3)固体培养 固体培养是在微生物培养的基础上发展起来的植物细胞培养方法。固体 培养基的凝固剂除去特殊研究外，几乎都使用琼脂，浓度一般为 2％～3％，细胞在培养基 表面生长。原生质体固体培养则需混入培养基内进行嵌合培养，或者使原生质体在固体-液 体之间进行双相培养。 (4)液体培养液体培养 也是在微生物培养的基础上发展起来的植物细胞培养方法。液 体培养可分为静止培养和振荡培养等两类。静止培养不需要任何设备，适合于某些原生质体 的培养。振荡培养需要摇床使培养物和培养基保持充分混合以利于气体交换。 (5)悬浮培养植物细胞的悬浮培养 是一种使组织培养物分离或单细胞并不断扩增的方 法。在进行细胞培养时，需要提供容易破裂的愈伤组织进行液体振荡培养，愈伤组织经过悬 浮培养可以产生比较纯一的单细胞。用于悬浮培养的愈伤组织应该是易碎的，这样在液体培 养条件下能获得分散的单细胞，而紧密不易碎的愈伤组织就不能达到上述目的。 (6)固定化培养 固定化培养是在微生物和酶的固定化培养基础上发展起来的植物细 胞培养方法。该法与固定化酶或微生物细胞类似，应用最广泛的，能够保持细胞活性的固定 化方法是将细胞包埋于海藻酸盐或卡拉胶中。 四、植物细胞的大规模培养技术 目前用于植物细胞大规模培养的技术主要有植物细胞的大规模悬浮培养和植物细胞或 原生质体的固定化培养。 (一)植物细胞的大规模悬浮培养 悬浮培养通常采用水平振荡摇床，可变速率为 30～150r／min，振幅 2～4cm，温度 24～ 30℃。适合于愈伤组织培养的培养基不一定适合悬浮细胞培养。悬浮培养的关键就是要寻找 适合于悬浮培养物快速生长，有利于细胞分散和保持分化再生能力的培养基。 1、悬浮培养中的植物细胞的特性 由于植物细胞有其自身的特性，尽管人们已经在各种微生物反应器中成功进行了植物细 胞的培养，但是植物细胞培养过程的操作条件与微生物培养是不同的。与微生物细胞相比， 植物细胞要大得多，其平均直径要比微生物细胞大 30～100 倍。同时植物细胞很少是以单一