步骤2:PVDF膜与第二抗体孵育 ·第〓抗体:辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔 IgG抗体 向小塑料袋中加入封闭液3mL,加入第二抗体1.5 μL(1:2000),混匀后放入PVDF膜,赶走气泡,封 口。室温在上下摇床上平缓摇动1小时。 取出膜,放入平皿中,用PBST洗膜三次,每次在脱 色摇床上平缓摇动10分钟。步骤2：PVDF膜与第二抗体孵育 • 第二抗体：辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔 IgG抗体 • 向小塑料袋中加入封闭液3 mL，加入第二抗体1.5 mL（1:2000），混匀后放入PVDF膜，赶走气泡，封 口。室温在上下摇床上平缓摇动1小时。 • 取出膜，放入平皿中，用PBST洗膜三次，每次在脱 色摇床上平缓摇动10分钟