步骤1:封闭好的PVDF膜与第一抗体孵育 第一抗体∶兔抗人cmyc或β- actin单克隆抗体 向小塑料袋中加入3m封闭液,加入第一抗体15 uL(1:2000),混匀后放入PVDF膜,赶走气泡,封 口。室温在上下摇床上平缓摇动1小时。 ·取出膜,放入平皿中,用PBST洗膜三次,每次10分 钟(在脱色摇床上缓慢摇动)。步骤1：封闭好的PVDF膜与第一抗体孵育 • 第一抗体：兔抗人C-myc或b-actin单克隆抗体 • 向小塑料袋中加入3 mL封闭液，加入第一抗体1.5 mL（1:2000），混匀后放入PVDF膜，赶走气泡，封 口。室温在上下摇床上平缓摇动1小时。 • 取出膜，放入平皿中，用PBST洗膜三次，每次10分 钟（在脱色摇床上缓慢摇动）