表11.1.2重组DNA常用的核酸藤 核酸藤名称 主要功能 ⅡI型核酸内切限制酶「在特异性碱基序列部位切割DNA分子 DNA连接酶 将两条DNA分子或片段连接成一个DNA分 大肠杆菌DN聚合酶I通过向3’-端逐一增加核苷酸,填补 反(逆)转录酶 多核苷酸激酶 把一个磷酸分子加到多核苷酸链的5-0H末端 末端转移酶 将同聚物尾巴加到线性双链或单链DNA分子的3-0H末端 核酸外切酶III 从一条DNA链的3-端移去核苷酸残基 D核酸外切酶 自双链DNA分子的5-端移走单核苷酸,暴露出延伸的单链3-端 或性磷酸酶 人DNA分子的5’-端或3’-端或同时从5-和3’-端移去末端磷酸 S1核酸酶 将RNA和单链DMNA降解成5-单核苷酸,或切割双链核苷酸单链区 Bal31核酸酶 有单链特异的核酸内切酶特性,也有双链特异的核酸外切酶活性 Tag DNA聚合酶 在高温下一单链DNA为模板按5→3方向合成新生互补链 无论是细菌DNA还是哺乳动物的DNA,它们在结构上都是相容的,因此从一种机体得到 的DNA分子片断可以很容易地与来自另一种机体的DNA混合。这种类似性可以推广到质粒 ( Plasmids)。质粒是环状双股DNA分子,许多细菌中都有这种存在于染色体外的遗传物质 在重组DNA技术中,质粒在基因工程中的作用是作为载体DNA( Vector)。 EcoR14361Hind Ill 29 Fco57405 Aat|:286 EcoR V 185 Ban il 4 Nhe 1 229 Xmn 3963 sp BamH1 375 ph562 Hinc 1i 3907 Sca 13846 EcoN 1 622 Pyu I 373 sa651 Pst I 3609 Ase13539 Ppa I 3435 Eag I939 Nru I 972 PM/M 1 1315 smI1353 HgiE ll 3056 Eco5713002 Ava I 1425 ppm 11438 Ba144Da11447 AIwN I 2886 PpuM I 1 BspM I 1664 Pyu l 2066 Nde|2297 Tth111I2219 HgE!2295 Xca 1 2246 ACc I 2246 图11.1.2pBR322质粒酶切图谱3 表 11.1.2 重组 DNA 常用的核酸酶 核酸酶名称 主要功能 II 型核酸内切限制酶 在特异性碱基序列部位切割 DNA 分子 DNA 连接酶 将两条 DNA 分子或片段连接成一个 DNA 分子 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 通过向 3’-端逐一增加核苷酸，填补双链 DNA 分子上的单链缺口 反（逆）转录酶 以 RNA 分子为模板合成互补的 cDNA 多核苷酸激酶 把一个磷酸分子加到多核苷酸链的 5’-OH 末端 末端转移酶 将同聚物尾巴加到线性双链或单链 DNA 分子的 3’-OH 末端 核酸外切酶 III 从一条 DNA 链的 3’-端移去核苷酸残基 核酸外切酶 自双链 DNA 分子的 5’-端移走单核苷酸，暴露出延伸的单链 3’-端 碱性磷酸酶 从 DNA 分子的 5’-端或 3’-端或同时从 5’-和 3’-端移去末端磷酸 S1 核酸酶 将 RNA 和单链 DNA 降解成 5’-单核苷酸，或切割双链核苷酸单链区 Bal31 核酸酶 有单链特异的核酸内切酶特性，也有双链特异的核酸外切酶活性 Tag DNA 聚合酶 在高温下一单链 DNA 为模板按 5’→3’方向合成新生互补链 无论是细菌 DNA 还是哺乳动物的 DNA，它们在结构上都是相容的，因此从一种机体得到 的 DNA 分子片断可以很容易地与来自另一种机体的 DNA 混合。这种类似性可以推广到质粒 (Plasmids)。质粒是环状双股 DNA 分子，许多细菌中都有这种存在于染色体外的遗传物质。 在重组 DNA 技术中，质粒在基因工程中的作用是作为载体 DNA(Vector)。 图 11.1.2 pBR322 质粒酶切图谱