n×0.1川Tag酶(5U/D 混匀，取19叫分别加入n个0.21PCR管中，各管加入模板DNA1l轻轻用手捧一下 (2)PCR反应程序设计如下： 94℃，预变性5分钟 94℃，变性1分钟 55℃，退火1分钟 >35个循环 72℃，延伸1分钟 72℃，延伸5分钟 PCR反应在带热盖的PCR仪上进行，大约需要两个半小时. 2.PCR产物的检测 (3)制各1.2%的琼脂精凝胶. ()取5PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，紫外检测仪下观察，记录结果 五、注意事项 (①)使用的全部溶液都应该没有核酸和核酸酶的污染. (2②)所有PCR试剂中使用的水都应该是最高质量的双蒸水. (③)所有试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后再分装成仅够一次使用的量储存，从 而确保实验与实验之间的连续性.n×0.1μl Taq 酶(5U/μl) 混匀,取 19μl分别加入 n 个 0.2ml PCR 管中,各管加入模板 DNA 1μl, 轻轻用手摔一下. ⑵ PCR 反应程序设计如下: 94℃,预变性 5 分钟 94℃,变性 1 分钟 55℃,退火 1 分钟 35 个循环 72℃,延伸 1 分钟 72℃,延伸 5 分钟 PCR 反应在带热盖的 PCR 仪上进行,大约需要两个半小时. 2.PCR 产物的检测 ⑶ 制备 1.2%的琼脂糖凝胶. ⑷ 取 5μl PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳,紫外检测仪下观察,记录结果. 五、注意事项 ⑴ 使用的全部溶液都应该没有核酸和核酸酶的污染. ⑵ 所有 PCR 试剂中使用的水都应该是最高质量的双蒸水. ⑶ 所有试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后再分装成仅够一次使用的量储存,从 而确保实验与实验之间的连续性. 2