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性等方面。 定向性,抗体药物可以定向制造,就是根据需要制备具有不同治疗作用的抗 体药物。基于这些特点,我们可以用来制成“生物导弹”运送药物至病害部位, 主要是癌细胞,从而达到治疗效果。 (3)单克隆抗体的制备简述 (a)免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏 B淋巴细胞的过程 b)细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏 在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与 小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇 作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞 (c)选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培 养基。 (d)杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在 HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数 是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此, 必须进行筛选和克隆化 (e)单克隆抗体的大量制备单克隆抗体 的大量制备重要采用动物体内诱生法和体 外培养法 大鼠神经胶质细胞株瘤杂交瘤细胞株 体内诱生法,首先小鼠腹腔注射05ml 液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞 在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大, 用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细 胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得 所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置 不断出现,大大提高了抗体的生产量 3.技术的应用与效果性等方面。 定向性,抗体药物可以定向制造,就是根据需要制备具有不同治疗作用的抗 体药物。基于这些特点,我们可以用来制成“生物导弹”运送药物至病害部位, 主要是癌细胞,从而达到治疗效果。 (3)单克隆抗体的制备简述: (a)免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏 B 淋巴细胞的过程。 (b)细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏, 在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与 小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇 作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。 (c)选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用 HAT 选择性培 养基。 (d)杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在 HAT 培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数 是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此, 必须进行筛选和克隆化。 (e)单克隆抗体的大量制备单克隆抗体 的大量制备重要采用动物体内诱生法和体 外培养法。 体内诱生法,首先小鼠腹腔注射 0.5ml 液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2 周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞 在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约 1-2 周,可见小鼠腹部膨大。 用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细 胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得 所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置 不断出现,大大提高了抗体的生产量。 3. 技术的应用与效果
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