生物导弹技术 11302010017刘进步 物的形象称呼,它由单克隆抗 抗体包被的 体与药物、酶或放射性同位素 合面底有体B+:+一 而能自动导向,在生物体内与 抗体包被的纳米球被测蛋白样品荧光标记抗体 具有荧光信号的纳米球 特定目标细胞或组织结合,并 由其携带的药物产生治疗作用。 2.技术原理 (1)单克隆抗体简述 Antigen 抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞 有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种 cell-culture myeloma line 不同的B淋巴细胞系,含遗传基因不同的B淋巴细 胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分 子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的 Spleen cells 细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙, polyethy lene glycol 即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克 lect cddl maky 隆,并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专 propagate 一抗体的细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂 clones 增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成 一种决定簇的抗体,称为单克隆抗体。 (2)单克隆抗体性质 特异性,针对特定的单一抗原表位,它具有高 ANTIBODY ANTIHoDY 单克隆抗体制奤流程 度的特异性,抗肿瘤抗体药物的研究表明,其特异 性主要表现为特异性结合、选择性杀伤靶细胞、体内靶向性分布以及具有更强的 疗效。 多样性,主要表现在靶抗原的多样性、抗体结构的多样性、作用机制的多样
生物导弹技术 11302010017 刘进步 1. 生物导弹概述 “生物导弹”是免疫导向药 物的形象称呼，它由单克隆抗 体与药物、酶或放射性同位素 配合而成，因带有单克隆抗体 而能自动导向，在生物体内与 特定目标细胞或组织结合，并 由其携带的药物产生治疗作用。 2. 技术原理 （1）单克隆抗体简述： 抗体主要由 B 淋巴细胞合成。每个 B 淋巴细胞 有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏有上百万种 不同的 B 淋巴细胞系，含遗传基因不同的 B 淋巴细 胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分 子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的 B 细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙， 即克隆由许多个被激活B细胞的分裂增殖形成多克 隆，并合成多种抗体。如果能选出一个制造一种专 一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂 增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成 一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。 （2）单克隆抗体性质： 特异性，针对特定的单一抗原表位，它具有高 度的特异性，抗肿瘤抗体药物的研究表明，其特异 性主要表现为特异性结合、选择性杀伤靶细胞、体内靶向性分布以及具有更强的 疗效。 多样性，主要表现在靶抗原的多样性、抗体结构的多样性、作用机制的多样
性等方面。 定向性,抗体药物可以定向制造,就是根据需要制备具有不同治疗作用的抗 体药物。基于这些特点,我们可以用来制成“生物导弹”运送药物至病害部位, 主要是癌细胞,从而达到治疗效果。 (3)单克隆抗体的制备简述 (a)免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏 B淋巴细胞的过程 b)细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏 在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与 小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇 作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞 (c)选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培 养基。 (d)杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在 HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数 是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此, 必须进行筛选和克隆化 (e)单克隆抗体的大量制备单克隆抗体 的大量制备重要采用动物体内诱生法和体 外培养法 大鼠神经胶质细胞株瘤杂交瘤细胞株 体内诱生法,首先小鼠腹腔注射05ml 液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞 在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大, 用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细 胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得 所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置 不断出现,大大提高了抗体的生产量 3.技术的应用与效果
性等方面。 定向性，抗体药物可以定向制造，就是根据需要制备具有不同治疗作用的抗 体药物。基于这些特点，我们可以用来制成“生物导弹”运送药物至病害部位， 主要是癌细胞，从而达到治疗效果。 （3）单克隆抗体的制备简述： （a）免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏 B 淋巴细胞的过程。 （b）细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠，无菌操作取出脾脏， 在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与 小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇 作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。 （c）选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用 HAT 选择性培 养基。 （d）杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在 HAT 培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数 是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此， 必须进行筛选和克隆化。 （e）单克隆抗体的大量制备单克隆抗体 的大量制备重要采用动物体内诱生法和体 外培养法。 体内诱生法，首先小鼠腹腔注射 0.5ml 液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2 周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞 在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约 1-2 周，可见小鼠腹部膨大。 用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体。 体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细 胞产生并分泌单克隆抗体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得 所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置 不断出现，大大提高了抗体的生产量。 3. 技术的应用与效果
单克隆抗体用于临床诊断 和治疗,目前研究较多的是抗人 T细胞单克隆抗体,用以识别人 T细胞表面的不同抗原决定簇, 有oKT系统及Leu系统。T细胞 特别是免疫调节T细胞(T/h及Tc/s细胞)对于调控免疫应答和维持免疫自稳起 着至关重要的作用,临床上许多疾病的发生与免疫调节失常有关,因此,研究T细 胞在这些疾病中的变化,有助于探讨病因和辅助诊断。各种免疫缺损病、肿瘤或 感染性疾病都与免疫功能低下有关,而变态反应性疾病、自身免疫性疾病等与免 疫功能亢进有关。接受肾移植或骨髓移植的患者往往需应用各种免疫抑制剂以控 制排斥反应,T细胞亚群的检测有助于了解移植器官的排异和发展。抗人T细 胞单克隆抗体可用以治疗白血病、移植物抗宿主反应(GVHD)和急性肾排斥等,目 前尚处于摸索阶段
单克隆抗体用于临床诊断 和治疗，目前研究较多的是抗人 T 细胞单克隆抗体，用以识别人 T 细胞表面的不同抗原决定簇， 有 OKT 系统及 Leu 系统。T 细胞, 特别是免疫调节 T 细胞（Ti/h 及 Tc/s 细胞）对于调控免疫应答和维持免疫自稳起 着至关重要的作用,临床上许多疾病的发生与免疫调节失常有关,因此，研究 T 细 胞在这些疾病中的变化，有助于探讨病因和辅助诊断。各种免疫缺损病、肿瘤或 感染性疾病都与免疫功能低下有关，而变态反应性疾病、自身免疫性疾病等与免 疫功能亢进有关。接受肾移植或骨髓移植的患者往往需应用各种免疫抑制剂以控 制排斥反应， T 细胞亚群的检测有助于了解移植器官的排异和发展。抗人 T 细 胞单克隆抗体可用以治疗白血病、移植物抗宿主反应(GVHD)和急性肾排斥等，目 前尚处于摸索阶段
