真核生物中的染色体DNA与组蛋白结合成核蛋白(DNP),存在于核内。DNP溶于水和浓 盐溶液(如质量浓度为1mol/L的NaCl溶液),但不溶于质量浓度为0.14moL的NaCl溶 液。利用这一性质,可将细胞破碎后用浓盐溶液提取,然后用水稀释至0.14moL/,使DNP 纤维沉淀出来,缠绕在玻璃棒上,再经多次溶解和沉淀以达到纯化目的。苯酚是很强的蛋白 质变性剂,可用苯酚抽提,除去蛋白质。用水饱和的苯酚与DNP一起振荡,冷冻离心,DNA溶 于上层水相,不溶性变性蛋白质残留物位于中间界面,一部分变性蛋白质停留在酚相。如此 操作反复多次以除净蛋白质。将含DNA的水相合并,在有盐存在的条件下加2倍体积冷的乙 醇,可将DNA沉淀出来。再用乙醚和乙醇洗涤沉淀,用这种方法可以得到纯的DNA。 RNA比DNA更不稳定,而且 RNase又无处不在,因此RNA的分离更为困难。制备RNA通 常需要注意3点:(1)所有用于制备RNA的器具必须灭菌:(2)在破碎细胞的同时加入强 变性剂使 RNase失活;(3)在RNA的反应体系中加入 RNase的抑制剂。目前最常用的制备RNA 的方法有两种:(1)用酸性盐/苯酚/氯仿抽提。是极强烈的蛋白质变性剂,它几乎使所有遇 到的蛋白质都变性。用苯酚和氯仿多次除净蛋白质。此法用于小量制备RNA。(2)用盐/氯化 铯将细胞抽提物进行密度梯度离心。蛋白质在最上层,DNA位于中间,RNA沉在底部。此法可 制备较大量高纯度的天然RNA。不同功能RNA常分布于细胞的不同部位,分离这些RNA常常先 用差速离心法,将细胞核、线粒体、叶绿体、细胞质等各部分分开,再从这些部分中分离出 RNA。 3.核酸的水解 核酸的嘌呤碱和嘧啶碱与戊糖形成糖苷键。戊糖有两种:核糖和脱氧核糖,所以形成4 种糖苷,即嘌呤核苷、嘌呤脱氧核苷、嘧啶核苷、嘧啶脱氧核苷。磷酸基与两种糖类分别形 成核糖磷酸酯和脱氧核糖磷酸酯。所有糖苷键和磷酸酯键都能被酸、碱和酶水解 水解核酸的酶种类很多。非特异性水解磷酸二酯键的酶为磷酸二酯酶;专一水解核酸的 磷酸二酯酶称为核酸酶。核酸酶按底物专一性分类,又可分为作用于核糖核酸的核糖核酸酶, 作用于脱氧核糖核酸的脱氧核糖核酸酶:按对底物作用的方式,可分为核酸内切酶和核酸外 切酶。内切酶的作用点在多核苷酸链的内部,而外切酶的作用点从多核苷酸链的末端开始, 逐个地将核苷酸切下,从而对核酸进行降解。也有少数酶既可内切,也能外切。 4.核酸在不同生物(细胞)中的分布状况 所有生物细胞都含有DNA和RNA这两类核酸。原核细胞DNA集中在拟核。真核细胞DNA 分布在核内,与蛋白质组成染色体(染色质)。线粒体、叶绿体等细胞器也含有DNA。病毒或 只含DNA,或只含RNA,从未发现两者兼有的病毒。原核生物DNA、质粒DNA、真核生物细胞 器DNA都是环状双链DNA。所谓质粒是指拟核DNA外基因,它能够自主复制,并表现出特定的 性状。真核生物染色体DMA是线型双链DNA。病毒DNA种类很多,结构各异。动物病毒DM通 常是环状双链或线型双链。植物病毒基因组大多是RNA,DNA较少见。少数植物病毒DNMA或是 环状双链,或是环状单链。噬菌体DNA多数是线型双链,也有为环状双链的。真核生物中的染色体 DNA 与组蛋白结合成核蛋白（DNP），存在于核内。DNP 溶于水和浓 盐溶液（如质量浓度为 1 mol/L 的 NaCl 溶液），但不溶于质量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶 液。利用这一性质，可将细胞破碎后用浓盐溶液提取，然后用水稀释至 0.14 mol/L，使 DNP 纤维沉淀出来，缠绕在玻璃棒上，再经多次溶解和沉淀以达到纯化目的。苯酚是很强的蛋白 质变性剂，可用苯酚抽提，除去蛋白质。用水饱和的苯酚与 DNP 一起振荡，冷冻离心，DNA 溶 于上层水相，不溶性变性蛋白质残留物位于中间界面，一部分变性蛋白质停留在酚相。如此 操作反复多次以除净蛋白质。将含 DNA 的水相合并，在有盐存在的条件下加 2 倍体积冷的乙 醇，可将 DNA 沉淀出来。再用乙醚和乙醇洗涤沉淀，用这种方法可以得到纯的 DNA。 RNA 比 DNA 更不稳定，而且 RNase 又无处不在，因此 RNA 的分离更为困难。制备 RNA 通 常需要注意 3 点：（1）所有用于制备 RNA 的器具必须灭菌；（2）在破碎细胞的同时加入强 变性剂使 RNase 失活；（3）在 RNA 的反应体系中加入 RNase 的抑制剂。目前最常用的制备 RNA 的方法有两种：（1）用酸性盐/苯酚/氯仿抽提。是极强烈的蛋白质变性剂，它几乎使所有遇 到的蛋白质都变性。用苯酚和氯仿多次除净蛋白质。此法用于小量制备 RNA。（2）用盐/氯化 铯将细胞抽提物进行密度梯度离心。蛋白质在最上层，DNA 位于中间，RNA 沉在底部。此法可 制备较大量高纯度的天然 RNA。不同功能 RNA 常分布于细胞的不同部位，分离这些 RNA 常常先 用差速离心法，将细胞核、线粒体、叶绿体、细胞质等各部分分开，再从这些部分中分离出 RNA。 3.核酸的水解 核酸的嘌呤碱和嘧啶碱与戊糖形成糖苷键。戊糖有两种：核糖和脱氧核糖，所以形成 4 种糖苷，即嘌呤核苷、嘌呤脱氧核苷、嘧啶核苷、嘧啶脱氧核苷。磷酸基与两种糖类分别形 成核糖磷酸酯和脱氧核糖磷酸酯。所有糖苷键和磷酸酯键都能被酸、碱和酶水解。 水解核酸的酶种类很多。非特异性水解磷酸二酯键的酶为磷酸二酯酶；专一水解核酸的 磷酸二酯酶称为核酸酶。核酸酶按底物专一性分类，又可分为作用于核糖核酸的核糖核酸酶， 作用于脱氧核糖核酸的脱氧核糖核酸酶；按对底物作用的方式，可分为核酸内切酶和核酸外 切酶。内切酶的作用点在多核苷酸链的内部，而外切酶的作用点从多核苷酸链的末端开始， 逐个地将核苷酸切下，从而对核酸进行降解。也有少数酶既可内切，也能外切。 4.核酸在不同生物（细胞）中的分布状况 所有生物细胞都含有 DNA 和 RNA 这两类核酸。原核细胞 DNA 集中在拟核。真核细胞 DNA 分布在核内，与蛋白质组成染色体（染色质）。线粒体、叶绿体等细胞器也含有 DNA。病毒或 只含 DNA，或只含 RNA，从未发现两者兼有的病毒。原核生物 DNA、质粒 DNA、真核生物细胞 器 DNA 都是环状双链 DNA。所谓质粒是指拟核 DNA 外基因，它能够自主复制，并表现出特定的 性状。真核生物染色体 DNA 是线型双链 DNA。病毒 DNA 种类很多，结构各异。动物病毒 DNA 通 常是环状双链或线型双链。植物病毒基因组大多是 RNA，DNA 较少见。少数植物病毒 DNA 或是 环状双链，或是环状单链。噬菌体 DNA 多数是线型双链，也有为环状双链的