五、操作方法 1. 新鲜猪心50 g，切碎，加等量0.145 mol/L TCA，高 速组织捣碎机匀浆2min。使cytc从线粒体膜上解聚 下来。 2. 用6层纱布过滤匀浆液去杂质。并于室温放置抽提3 小时。 3. 用10％ NaOH溶液将上述混合液调pH值至7.3，并 测定体积。 ——以利于（NH4）2SO4沉淀去杂蛋白 4. 按500 g/L混合液缓慢加入（NH4）2SO4粉末，边加 边搅拌。放置一段时间，4000 r/m离心20 min去除 沉淀，得到粉红色滤液，测定体积。 5. 进一步按50 g/L滤液缓慢加入（NH4）2SO4粉末， 边加边搅拌。放置一段时间，4000 r/m离心20 min 去除沉淀，得到粉红色滤液，测定体积。 6. 加 入 20%TCA （ 25 mol/L 上 清 ） — 沉 淀 cytc 。 3000r/m离心15 min得到沉淀。五、操作方法 1. 新鲜猪心50 g，切碎，加等量0.145 mol/L TCA，高 速组织捣碎机匀浆2min。使cytc从线粒体膜上解聚 下来。 2. 用6层纱布过滤匀浆液去杂质。并于室温放置抽提3 小时。 3. 用10％ NaOH溶液将上述混合液调pH值至7.3，并 测定体积。 ——以利于（NH4）2SO4沉淀去杂蛋白 4. 按500 g/L混合液缓慢加入（NH4）2SO4粉末，边加 边搅拌。放置一段时间，4000 r/m离心20 min去除 沉淀，得到粉红色滤液，测定体积。 5. 进一步按50 g/L滤液缓慢加入（NH4）2SO4粉末， 边加边搅拌。放置一段时间，4000 r/m离心20 min 去除沉淀，得到粉红色滤液，测定体积。 6. 加 入 20%TCA （ 25 mol/L 上 清 ） — 沉 淀 cytc 。 3000r/m离心15 min得到沉淀