2%伊红水溶液 20 ml 0.5%美蓝水溶液 蒸馏水 1000ml A.232制法 将琼脂加到∞00ml蒸馏水中,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾和蛋白胨,混匀使溶解,再加入 蒸馏水补足至1000ml,调整pH至72~74。趁热用脱脂棉和砂布过滤,再加入乳糖,混匀,定量 分装于烧瓶内,115℃灭菌20min,作为储备培养基贮存于冷暗处备用。 临用时,加热融化储备培养基,待冷至60℃左右,根据烧瓶内培养基的容量,加入一定量的已 灭菌的2%伊红水溶液和05%美蓝水溶液,充分摇匀(防止产生气泡),倾注平皿备用。 养液 A.2.4乳糖蛋白胨培养 A.2.4.1成分 蛋白胨 10g 牛肉膏 g 乳糖 氯化钠 5 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 蒸馏水 1000ml A.2.4.2制法 将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000ml蒸馏水中,调整p到72~74,加入 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml,充分混匀,分装于内有倒管的试管中。115℃灭菌20min。贮存于冷暗 处备用。 A.2.5革兰氏染色液 A.2.5.1结晶紫染色液 结晶紫 95%乙醇溶液 1%草酸铵水溶液 000m 将结晶紫溶于乙醇中,然后与草酸铵水溶液混合 A.252革兰氏碘液 碘 碘化钾 蒸馏水 将碘与碘化钾混合,加入蒸馏水少许,充分摇匀,待完全溶解,再加入蒸馏水至300ml A.2.5.3脱色液 95%乙醇 A.2.54沙黄复染液 95%乙醇 g 蒸馏水 将沙黄溶于95%乙醇中,然后用蒸馏水稀释 A.2.6染色法 染色的基本步骤为:1)涂片:在载玻片上滴加一滴生理盐水,用灭菌的接种环取菌落少许,与 生理盐水混匀,涂布成薄膜;2)干燥:在室温中使自然干燥;3)固定:将涂片迅速通过火焰2~3 次,以载玻片反面接触皮肤,热而不烫为度;4)染色:滴加结晶紫染色液,染色1min,水洗;5)