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4.2FISH技术的发展 1987年,创建了染色体原 位抑制杂交(CISS)法。 Cherif用 随机引物法来标记探针DNA, 在亲和素化荧光素的基础上再 加相应的生物素化抗亲和素抗 体,通过增加亲和素的检测复合 物的层数,使荧光信号不断扩 大,从而明显地提高了检测灵敏 度。 Cremer等用生物素和汞或 氨基乙酰荧光素(AAF)标记探 针建立了双色FISH技术。 Nederlof等用3种荧光素探测3 种以上的靶位DNA序列,创建 了多色FSH方法。 Speicher和 Red等用不同的荧光染料组合 标记不同的染色体,经过计算机 图像分析,可以显示人类24条 染色体的FISH图像。Guan等 运用染色体切割技术制备了人 类染色体24个长臂及19个短臂 的染色体臂涂染探针 (chromosome arm painting probe,CAP),弥补了整条染色 体涂染探针不能分辨同一染色 体臂间易位及染色体倒位的缺 点,创建了 micro-FISH或反向 染色体涂染( reverse4.2 FISH 技术的发展 1987 年,创建了染色体原 位抑制杂交(CISS)法。Cherif 用 随机引物法来标记探针 DNA, 在亲和素化荧光素的基础上再 加相应的生物素化抗亲和素抗 体,通过增加亲和素的检测复合 物的层数,使荧光信号不断扩 大,从而明显地提高了检测灵敏 度。Cremer 等用生物素和汞或 氨基乙酰荧光素(AAF)标记探 针建立了双色 FISH 技术。 Nederlof 等用 3 种荧光素探测 3 种以上的靶位 DNA 序列,创建 了多色 FISH 方法。Speicher 和 Ried 等用不同的荧光染料组合 标记不同的染色体,经过计算机 图像分析,可以显示人类 24 条 染色体的 FISH 图像。Guan 等 运用染色体切割技术制备了人 类染色体24个长臂及19个短臂 的染色体臂涂染探针 (chromosome arm painting probe,CAP),弥补了整条染色 体涂染探针不能分辨同一染色 体臂间易位及染色体倒位的缺 点,创建了 micro-FISH 或反向 染色体涂染(reverse
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