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原理 本实验通过CaCl2对特定的大肠杆菌处理,制备感受 态的细菌。这些细菌可使每微克超螺旋质粒DNA,如一些 插入目的DNA片段的重组质粒,产生5×10-2X10'个转 化的菌落。 当质粒与这些大肠杆菌混合后,质粒粘附在大肠杆 菌的表面,在42C的温度时,大肠杆菌出现热休克,质 粒可通过大肠杆菌细胞膜上形成的空隙进入菌体内。随 后,加入LB培养液,于37℃振动培养可使细菌复苏,并 且表达质粒编码的抗生素抗性基因,提高转化效率。转化 成功的大肠杆菌可以在相应抗生素培养皿中传代,形成菌 落
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