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YYYY Antibody Target protein Enzyme-labeled antibody Enzyme reaction → Antigen level 将目标蛋白的抗体固定在微板孔表面,首先与目标蛋白结合,然后与另一个目标蛋白特 异性抗体结合(酶标记)。加入酶底物并经洗涤后,测定微孔板结合酶的活性。固定化抗体 (橙色)和酶标抗体(绿色)必须识别目标蛋白的不同表位。 (四)竞争法 Substrate ples including low levels YYY→x YYYY Substrate of the tarmac uding high levels YYYY→→ 0-Antigen level YAntibody m Target protein Enzyme-labeled antigen Enzyme reaction 将目标蛋白对应的抗体固定在微板孔表面,与含有目标蛋白和己知数量的酶标记目标蛋 白的样品结合。反应结束后,测定微孔板结合酶的活性。 当样品中抗原水平较高时,抗体结合酶标记抗原水平较低,颜色较浅。相反,当抗体结 合酶标记抗原水平较低时,抗体结合酶标记抗原水平较高,颜色较深。上图和右图展示了样 品中吸收和抗原水平之间的关系。 三、技术应用 由于 ELISA可用于评估样本中是否存在抗原或抗体,因此它是测定血清抗体浓度的重 要工具(如艾滋病毒检测、西尼罗河病毒检测)。它还在食品工业中应用于检测潜在的食物过 敏原,以及用作血清学血清学检测腹腔疾病。 ELISA也可用于毒理学中作为某些药物的快速 预筛选 由于其高灵敏度, ELISA是第一个广泛用于HIV检测的检测方法。而丹尼斯·比德韦尔 博士和阿利斯特·沃勒博士创造了用来检测各种疾病的 ELISA测试,如疟疾 除此之外, ELISA还可以用于: 肺结核中结核分枝杄菌抗体的检测 粪便中轮状病毒的检测 血清中乙肝标志物的检测 粪便中大肠杆菌肠毒素的检测将目标蛋白的抗体固定在微板孔表面,首先与目标蛋白结合,然后与另一个目标蛋白特 异性抗体结合(酶标记)。加入酶底物并经洗涤后,测定微孔板结合酶的活性。固定化抗体 (橙色)和酶标抗体(绿色)必须识别目标蛋白的不同表位。 (四)竞争法 将目标蛋白对应的抗体固定在微板孔表面,与含有目标蛋白和已知数量的酶标记目标蛋 白的样品结合。反应结束后,测定微孔板结合酶的活性。 当样品中抗原水平较高时,抗体结合酶标记抗原水平较低,颜色较浅。相反,当抗体结 合酶标记抗原水平较低时,抗体结合酶标记抗原水平较高,颜色较深。上图和右图展示了样 品中吸收和抗原水平之间的关系。 三、技术应用 由于 ELISA 可用于评估样本中是否存在抗原或抗体,因此它是测定血清抗体浓度的重 要工具(如艾滋病毒检测、西尼罗河病毒检测)。它还在食品工业中应用于检测潜在的食物过 敏原,以及用作血清学血清学检测腹腔疾病。ELISA 也可用于毒理学中作为某些药物的快速 预筛选。 由于其高灵敏度,ELISA 是第一个广泛用于 HIV 检测的检测方法。而丹尼斯·比德韦尔 博士和阿利斯特·沃勒博士创造了用来检测各种疾病的 ELISA 测试,如疟疾。 除此之外,ELISA 还可以用于: ⚫ 肺结核中结核分枝杆菌抗体的检测 ⚫ 粪便中轮状病毒的检测 ⚫ 血清中乙肝标志物的检测 ⚫ 粪便中大肠杆菌肠毒素的检测
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