3.51光源 白炽灯:钨灯、卤钨灯 B、气体放电灯:氢、氙、汞,常用氙灯(波长:200-700nm) C、激光光源 3.52单色器 闪耀光栅 3.53检测器 光电倍增管 36实验技术 36.1经常用标准基准物质校正仪器波长 362选择溶剂 由于偶极、氢键作用,激发光谱和发射光谱发生位移.增大溶剂极性可使荧光强度增强 363浓度效应(内滤效应) 荧光物质浓度大时,光强与浓度不成线性关系。原因:A、发光集中在一边B、自吸收效应 3.64温度的影响 低温荧光 3.7荧光法的应用 同步荧光法 对多组分的测定 混合物荧光光谱比较复杂不易分开。使激发和发射光波长保持一固定差距,对试样进行扫描, 获得荧光信号。因为激发和发射光谱均一样的物质不多,因而可提高选择性和分辨率。 例如,对环境样品中PAH的同步荧光测定 4磷光和发光光度法 4.1磷光 4.1.1磷光的产生和磷光光谱 激发态电子由第一激发单重态的最低振动能级以系间窜跃方式转至第一激发三重态,再经过 振动弛豫,转至其最低振动能级,由此激发态跃回至基态时,便发射磷光 固定激发光波长为其最大处,测不同波长下的磷光强度,得磷光光谱曲线。 磷光的产生涉及到激发单重态经系间窜跃转至激发三重态(S T1)和由激发三重态经 禁阻跃迁回到基态(T1S0),在动力学上处于不利的情况,所以很容易受其他辐射或无辐射 跃迁的干扰而使磷光强度减弱,甚至完全消失。T1S0跃迁过程是自旋禁阻的,其发光速率 较慢,约为10-4100s,强度相对较弱。6 3.5.1 光源 A、白炽灯：钨灯、卤钨灯 B、气体放电灯：氢、氙、汞，常用氙灯（波长：200-700nm） C、激光光源 3.5.2 单色器 闪耀光栅 3.5.3 检测器 光电倍增管 3.6 实验技术 3.6.1 经常用标准基准物质校正仪器波长 3.6.2 选择溶剂 由于偶极、氢键作用，激发光谱和发射光谱发生位移．增大溶剂极性可使荧光强度增强 3.6.3 浓度效应（内滤效应） 荧光物质浓度大时，光强与浓度不成线性关系。原因：A、发光集中在一边 B、自吸收效应 3.6.4 温度的影响 低温荧光 3.7 荧光法的应用 同步荧光法 对多组分的测定 混合物荧光光谱比较复杂不易分开。使激发和发射光波长保持一固定差距，对试样进行扫描， 获得荧光信号。因为激发和发射光谱均一样的物质不多，因而可提高选择性和分辨率。 例如，对环境样品中 PAH 的同步荧光测定 4 磷光和发光光度法 4.1 磷光 4.1.1 磷光的产生和磷光光谱 激发态电子由第一激发单重态的最低振动能级以系间窜跃方式转至第一激发三重态，再经过 振动弛豫，转至其最低振动能级，由此激发态跃回至基态时，便发射磷光。 固定激发光波长为其最大处，测不同波长下的磷光强度，得磷光光谱曲线。 磷光的产生涉及到激发单重态经系间窜跃转至激发三重态（S1 T1）和由激发三重态经 禁阻跃迁回到基态（T1 S0），在动力学上处于不利的情况，所以很容易受其他辐射或无辐射 跃迁的干扰而使磷光强度减弱，甚至完全消失。T1 S0 跃迁过程是自旋禁阻的，其发光速率 较慢，约为 10-4—100S，强度相对较弱