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7、火焰干燥制片:放2一3个根尖在载片上,加一小滴固定液,用镊子将根尖敲醉至浆状。再滴 2一3滴周定液,迅速用镊子夹住载片在酒精灯火焰上加热至着火,然后吹灭火焰。载片在空气 中自然干燥」 8、染色:Giemsa染色液染色,1-3h。自来水冲洗,晾干。 五、作业 1、制备分散良好的染色体制片。 2、绘出有丝分裂各时期的简图。 附:Giemsa(吉姆莎)染液配制 磷酸缓冲液(pH6.8): A液:1/15磷酸二氢钾:称取P0,9.118g溶于1000m1蒸馏水中 B液:1/15磷酸氢二钠:称取NaP0.2H011.876g溶于1000m1蒸偏水中。 使用时按A:B=51:49即配成pH6.8磷酸缓冲液。 Giemsa母液: 取Giemsa粉剂0.5g,加少量甘油研磨至无颗粒(约30分钟以上),再加入甘油共达33ml, 放在56℃温箱或水浴内2小时,促使溶化,冷却后加入甲醇33m1,室温下放置2一3周后,过滤 使用。 用时将Giesa母液用磷酸缓冲液1:20稀释,应随用随配 7、火焰干燥制片:放 2-3 个根尖在载片上,加一小滴固定液,用镊子将根尖敲碎至浆状。再滴 2-3 滴固定液,迅速用镊子夹住载片在酒精灯火焰上加热至着火,然后吹灭火焰。载片在空气 中自然干燥。 8、染色:Giemsa 染色液染色,1-3h。自来水冲洗,晾干。 五、作业 1、制备分散良好的染色体制片。 2、绘出有丝分裂各时期的简图。 附: Giemsa (吉姆莎)染液配制 磷酸缓冲液(pH6.8): A液:1/15 磷酸二氢钾:称取KH2PO4 9.118g溶于 1000ml蒸馏水中。 B液:1/15 磷酸氢二钠:称取Na2HPO4.2H2O11.876g溶于 1000ml蒸馏水中。 使用时按 A:B=51:49 即配成 pH6.8 磷酸缓冲液。 Giemsa 母液: 取 Giemsa 粉剂 0.5g,加少量甘油研磨至无颗粒(约 30 分钟以上),再加入甘油共达 33ml, 放在 56℃温箱或水浴内 2 小时,促使溶化。冷却后加入甲醇 33ml,室温下放置 2-3 周后,过滤 使用。 用时将 Giemsa 母液用磷酸缓冲液 1:20 稀释,应随用随配。 2
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