实验五人类性染色质标本的制备与观察 一、实验目的 l.掌握人类间期细胞核中性染色质(sex chromatin)的形态特征 2.熟悉X染色质和Y染色质的检查方法机器意义。 二、实验原理 1.人类的性染色质有X染色质和Y染色质两种。 X-染色质又称为X-小体或Bar小体，是由雌性体细胞中的两条X染色 体其中一条失活形成的，这条染色体中的染色质属于异染色质，呈现浓缩状 态，无转录活性，在间期核中变成深染的小体，常紧贴于核膜内缘，呈凸平 形，圆形，扁平或三角形，直径约1微米大小。正常女性间期细胞中可见 个X小体阳，而正常男性细胞由于只有一条X染色体并且不失活，所以见 不到X小体。在X染色体数目异常所引起的染色体病患者的细胞中，可发 生X小体的缺失或多个X小体。细胞中X小体的数目等于n-1,其中n=X 染色体的数目。 男性Y染色体长臂异染色质部分在间期细胞核中可以被荧光染料着色 形成强荧光小体，这就是Y染色质，又称为Y小体。细胞中Y小体的数目 等于Y染色体的数目 临床上通过X小体或Y小体的检查，可以初步诊断出性染色体数目异 常的遗传病患者。 三、实验用品 1.材料：口腔上皮细胞： 2.器材：显微镜、荧光光源或荧光显微镜、镊子、牙签、载玻片、盖 玻片、滴管、擦镜纸、漱口杯、玻璃笔、吸水纸等： 3.试剂：硫堇染液、甲醇-冰醋酸固定液、0.5%盐酸阿的平染液、95% 酒精、蒸馏水、乙醚、Mcl1 lvaine氏磷酸缓冲液。 四、实验内容与方法 (一)X-染色质标本的制备与观塞 1.取材与涂片：受检者用水漱口后，用清洁牙签纯端在口腔鳃面用力 刮取口腔粘膜的深层上皮细胞，均匀涂在洁净载玻片上。 2.固定：涂片后立即放入固定液（甲醇：冰乙酸=3：1）中固定15分 钟。取出晾干。 2121 实验五 人类性染色质标本的制备与观察 一、实验目的 1．掌握人类间期细胞核中性染色质（sex chromatin）的形态特征 2．熟悉 X 染色质和 Y 染色质的检查方法机器意义。 二、实验原理 1．人类的性染色质有 X 染色质和 Y 染色质两种。 X-染色质又称为 X-小体或 Barr 小体，是由雌性体细胞中的两条 X 染色 体其中一条失活形成的，这条染色体中的染色质属于异染色质，呈现浓缩状 态，无转录活性，在间期核中变成深染的小体，常紧贴于核膜内缘，呈凸平 形，圆形，扁平或三角形，直径约 1 微米大小。正常女性间期细胞中可见一 个 X 小体阳，而正常男性细胞由于只有一条 X 染色体并且不失活，所以见 不到 X 小体。在 X 染色体数目异常所引起的染色体病患者的细胞中，可发 生 X 小体的缺失或多个 X 小体。细胞中 X 小体的数目等于 n﹣1，其中 n=X 染色体的数目。 男性 Y 染色体长臂异染色质部分在间期细胞核中可以被荧光染料着色 形成强荧光小体，这就是 Y 染色质，又称为 Y-小体。细胞中 Y 小体的数目 等于 Y 染色体的数目。 临床上通过 X-小体或 Y-小体的检查，可以初步诊断出性染色体数目异 常的遗传病患者。 三、实验用品 1．材料：口腔上皮细胞； 2．器材：显微镜、荧光光源或荧光显微镜、镊子、牙签、载玻片、盖 玻片、滴管、擦镜纸、漱口杯、玻璃笔、吸水纸等； 3．试剂：硫堇染液、甲醇-冰醋酸固定液、0.5%盐酸阿的平染液、95% 酒精、蒸馏水、乙醚、Mcllvaine 氏磷酸缓冲液。 四、实验内容与方法 （一）X-染色质标本的制备与观察 l．取材与涂片：受检者用水漱口后，用清洁牙签钝端在口腔鳃面用力 刮取口腔粘膜的深层上皮细胞，均匀涂在洁净载玻片上。 2．固定：涂片后立即放入固定液（甲醇∶冰乙酸＝3∶l）中固定 15 分 钟。取出晾干