实验三、PCR扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 6学时 实验四、质粒DNA的酶切及重组DNA的构建 6学时 实验五、重组质粒DNA转化大肠杆菌 8学时 6 实验六、Southern印迹 8学时 七、实验目的、内容与要求 实验1大肠杆菌质粒DNA的提取及电泳 实验目的：掌握大肠杆菌质粒DNA的提取的原理及方法，DNM电泳的原理及方法。 实验内容：大肠杆菌质粒DNA的提取及电泳。 实验要求：用碱裂解法提取质粒DNA,要求每两个学生一组，要提取到质粒DNA,并观察到质粒的构 像，并照相完成实验报告。 实验2水稻基因DNA的提取 实验目的：掌握用SDS法提取水稻基因组DNA的原理及方法。 实验内容：水稻基因组DNA的提取。 实验要求：要求每两个学生一组，要提取到水稻基因组DNA,并照相完成实验报告。 实验3PCR扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 实验目的：掌握PCR的原理和方法。 实验内容：用引物从水稻基因组DNA中扩增出目标基因片段，用水稻基因组DNA测定核酸的浓度及质 量。 实验要求：要求每两个学生一组，要求扩增出目标片段，并照相。用学会测定核酸的浓度及质量的原 理及方法，完成实验报告。 实验4质粒DNA的酶切及重组DNA的构建 实验目的：掌握DNA的酶切和连接。 实验内容：质粒DNA的酶切及PCR产物与载体的连接。 实验要求：将连接产物下次备用。 实验5重组质粒DNA转化大肠杆菌 实验目的：掌握重组DA的转化及筛选的原理及方法。 实验内容：感受态大肠杆菌的制备及转化。 实验要求：要求每两个学生一组，获得含蓝白斑的平皿，拍照后完成实验报告。 实验6 Southern印迹 实验目的：掌握Southern印迹的原理和方法 实验内容：酶切DNA的转印，探针标记及杂交。 实验要求：要求每两个学生一组，获得杂交X光片，拍照后完成实验报告。3 实验三、ＰＣＲ扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 ６学时 4 实验四、质粒ＤＮＡ的酶切及重组ＤＮＡ的构建 6 学时 5 实验五、重组质粒ＤＮＡ转化大肠杆菌 ８学时 6 实验六、Ｓouthern 印迹 8 学时 七、实验目的、内容与要求 实验 1 大肠杆菌质粒ＤＮＡ的提取及电泳 实验目的：掌握大肠杆菌质粒ＤＮＡ的提取的原理及方法，DNA 电泳的原理及方法。 实验内容：大肠杆菌质粒ＤＮＡ的提取及电泳。 实验要求：用碱裂解法提取质粒 DNA，要求每两个学生一组，要提取到质粒 DNA，并观察到质粒的构 像，并照相完成实验报告。 实验 2 水稻基因ＤＮＡ的提取 实验目的：掌握用 SDS 法提取水稻基因组 DＮＡ的原理及方法。 实验内容：水稻基因组ＤＮＡ的提取。 实验要求：要求每两个学生一组，要提取到水稻基因组 DNA，并照相完成实验报告。 实验 3 ＰＣＲ扩增电泳及产物的回收及核酸定量分析 实验目的：掌握 PCR 的原理和方法。 实验内容：用引物从水稻基因组 DNA 中扩增出目标基因片段，用水稻基因组 DNA 测定核酸的浓度及质 量。 实验要求：要求每两个学生一组，要求扩增出目标片段，并照相。用学会测定核酸的浓度及质量的原 理及方法，完成实验报告。 实验 4 质粒ＤＮＡ的酶切及重组ＤＮＡ的构建 实验目的：掌握 DNA 的酶切和连接。 实验内容：质粒ＤＮＡ的酶切及 PCR 产物与载体的连接。 实验要求：将连接产物下次备用。 实验 5 重组质粒ＤＮＡ转化大肠杆菌 实验目的：掌握重组 DNA 的转化及筛选的原理及方法。 实验内容：感受态大肠杆菌的制备及转化。 实验要求：要求每两个学生一组，获得含蓝白斑的平皿，拍照后完成实验报告。 实验 6 Ｓouthern 印迹 实验目的：掌握Ｓouthern 印迹的原理和方法 实验内容：酶切 DNA 的转印，探针标记及杂交。 实验要求：要求每两个学生一组，获得杂交 X 光片，拍照后完成实验报告