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·肽链(N端氨基酸)与PTC偶联,生成PTC肽 ·环化断裂:最靠近PTC基的肽键断裂,生成PTC-氨基酸和少 一 残基的肽链,同时PTC氨基酸环化生成PTH-氨基酸 ·分离PTH-氨基酸 ·层析法鉴定 Edman降解法的改进方法-DNS-Edman降解法 ■用DNS(二甲基萘磺酰氯)测定N端氨基酸 ■原理DNFB法相同 ■但水解后的DNS-氨基酸不需分离,可直接用电泳或层析法鉴定 ■由于DNS有强烈荧光,灵敏度比DNFB法高I00倍,比Edman法高 几到十几倍 。可用于微量氨基酸的定量 • 肽链(N端氨基酸)与PITC偶联,生成PTC-肽 • 环化断裂:最靠近PTC基的肽键断裂,生成PTC-氨基酸和少 • 一残基的肽链,同时PTC-氨基酸环化生成PTH-氨基酸 • 分离PTH-氨基酸 • 层析法鉴定 ◼ Edman降解法的改进方法- DNS-Edman降解法 ◼ 用DNS(二甲基萘磺酰氯)测定N端氨基酸 ◼ 原理DNFB法相同 ◼ 但水解后的DNS-氨基酸不需分离,可直接用电泳或层析法鉴定 ◼ 由于DNS有强烈荧光,灵敏度比DNFB法高100倍,比Edman法高 几到十几倍 ◼ 可用于微量氨基酸的定量
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