Pull-down-融合蛋白的表达 tac_promoter M13 pUC fwd_primer M13_puC_rev_primer M13_forward20_prime MscI 465 构建融合表达载体 M13_reverse_primer M13_pUC_rev_primer lac_promoter BstBI 655 GST pGEX 5 prlmer BaTHI 930 5124 loxP AmpR_promoter 大肠杆菌(BL21) EcoRI 1097 46 9ma11104 SalI 1107 转化 XhoI 1112 NotI 1118 lacI Eag11118 V621 pGEX-4T-LP Acceptor oGEX 3 prlmer 3843 1281 5127bp 挑取大肠杆菌 (BL21)表达克隆 AatII 1403 341E 1708 AmpR_promoter 2989 2195 IPTG诱导大肠杆菌 2562 BL21)表达蛋白 Ampicillin pBR322_origin PstI 2080 提取纯化融合蛋白 pGEX-4T-1-GSTPull-down-融合蛋白的表达 构建融合表达载体 大肠杆菌（BL21） 转化 挑取大肠杆菌 （BL21）表达克隆 IPTG诱导大肠杆菌 （BL21）表达蛋白 提取纯化融合蛋白 pGEX-4T-1-GST