实验原理 采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法测蛋白质分子量时,只 有完全打开二硫键,蛋白质分子才能被解聚,SDS才能 定量地结合到亚基上而给出相对迁移率和分子量对数的线 性关系。因此在用SDS处理样品同时往往用巯基乙醇处理, 统基乙醇是一种强还原剂,它使被还原的二硫键不易再氧 ,从而使很多不溶性蛋白质溶解而与SDS定量结合。 有许多蛋白质是由亚基(如血红蛋白)或两条以上肽链 (如胰凝乳蛋白酶)组成的,它们在SDS和巯基乙醇作用 下,解离成亚基或单条肽链,因此这一类蛋白质,测定时 只是它们的亚基或单条肽链的MW。 °已发现有些蛋白质不能用 SDS-PAGE测定分子量。如电 荷异常或构象异常的蛋白质,带有较大辅基的蛋白质(某 一些糖蛋白)以及一些结构蛋白,如胶原蛋自等二. 实验原理 • 采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测蛋白质分子量时，只 有完全打开二硫键， 蛋白质分子才能被解聚，SDS才能 定量地结合到亚基上而给出相对迁移率和分子量对数的线 性关系。因此在用SDS处理样品同时往往用巯基乙醇处理， 巯基乙醇是一种强还原剂，它使被还原的二硫键不易再氧 化，从而使很多不溶性蛋白质溶解而与SDS定量结合。 • 有许多蛋白质是由亚基（如血红蛋白）或两条以上肽链 （如胰凝乳蛋白酶）组成的，它们在SDS和巯基乙醇作用 下，解离成亚基或单条肽链，因此这一类蛋白质，测定时 只是它们的亚基或单条肽链的MW。 • 已发现有些蛋白质不能用SDS-PAGE测定分子量。如电 荷异常或构象异常的蛋白质，带有较大辅基的蛋白质（某 些糖蛋白）以及一些结构蛋白，如胶原蛋白等