催化水解时,His12起广义碱催化作用,接受一个质子,而Hisg起广义酸作 用,和磷酸的氧原子形成氢键 亚胺内酯水解:在咪唑缓冲液中得酰胺,而在磷酸缓冲液中,尽管pH 相同产物却为胺和酯,其区别即为磷酸盐双功能催化 (7)微环境影响 酶促反应在酶表面的疏水裂缝(活性中心)中进行,如同反应在有机溶 剂中进行,反应基团不为溶剂化,亲核亲电反应均可加速。如溶菌酶Glu3s 的羧基在非极性区,催化功能増速3×106倍。模拟酶由此设计胶束模拟酶和 环糊精等。 (四)酶催化反应机制实例: 溶菌酶( Lysozyme,EC3.2..7)是第一个用X-行射阐明结构和功能的 酶。生物功能为催化某些细菌细胞壁多糖的水解,结构如P395图10-9所示。 细胞壁是由NAG(N-乙酰氨基葡萄糖)和NAM(N-乙酰氨基葡萄糖乳酸) 通过β(1→4)糖蔗键交替排列而成的多糖。溶菌酶底物为NAG-NAM交替 的六糖,可表示为 ABCDEF (1)在酶活性部位凹穴中,底物受酶影响D-环发生变形,糖环构象从 椅式变成能量较高的半椅式或船式,接近过渡态构象 (2)酶活性基团处于非极性区的Glus的羧基不解离,提供一个H到D 环与E环间的糖苷键上氧原子上,D环上的C1与氧原子间的糖苷键断开,形 成正碳离子(SP2)过渡态中间物,并为处于极性区的活性基团Asps2上的羧 基负离子所稳定。六糖中的E及F两糖残基成HOEF离开,如P398图10-16 所示 (3)正碳离子中间产物进一步与来自溶剂中的OH反应,解除SP2张力 ABCD四糖残基离开酶分子,Glu3s同时质子化恢复原状。如P399图10-17 所示 (4)至次一次反应完成,细胞壁打开一个缺口催化水解时，His12 起广义碱催化作用，接受一个质子，而 His119 起广义酸作 用，和磷酸的氧原子形成氢键。 亚胺内酯水解：在咪唑缓冲液中得酰胺，而在磷酸缓冲液中，尽管 pH 相同产物却为胺和酯，其区别即为磷酸盐双功能催化。 （7） 微环境影响： 酶促反应在酶表面的疏水裂缝（活性中心）中进行，如同反应在有机溶 剂中进行，反应基团不为溶剂化，亲核亲电反应均可加速。如溶菌酶 Glu35 的羧基在非极性区，催化功能增速 3×106 倍。模拟酶由此设计胶束模拟酶和 环糊精等。 （四）酶催化反应机制实例： 溶菌酶（Lysozyme，EC3.2.1.17）是第一个用 X-衍射阐明结构和功能的 酶。生物功能为催化某些细菌细胞壁多糖的水解，结构如 P395 图 10-9 所示。 细胞壁是由 NAG（N-乙酰氨基葡萄糖）和 NAM（N-乙酰氨基葡萄糖乳酸） 通过β（1→4）糖蔗键交替排列而成的多糖。溶菌酶底物为 NAG-NAM 交替 的六糖，可表示为 ABCDEF。 （1） 在酶活性部位凹穴中，底物受酶影响 D-环发生变形，糖环构象从 椅式变成能量较高的半椅式或船式，接近过渡态构象。 （2） 酶活性基团处于非极性区的 Glu35 的羧基不解离，提供一个 H+到 D 环与 E 环间的糖苷键上氧原子上，D 环上的 C1 与氧原子间的糖苷键断开，形 成正碳离子（SP2）过渡态中间物，并为处于极性区的活性基团 Asp52 上的羧 基负离子所稳定。六糖中的 E 及 F 两糖残基成 HO-EF 离开，如 P398 图 10-16 所示。 （3） 正碳离子中间产物进一步与来自溶剂中的-OH 反应，解除SP2张力， ABCD 四糖残基离开酶分子，Glu35 同时质子化恢复原状。如 P399 图 10-17 所示。 （4） 至次一次反应完成，细胞壁打开一个缺口